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貨號 | FS-01S63856 |
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產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
FBP果糖1,6二磷酸酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63856 |
商品介紹:
測定意義
果糖-1,6二磷酸酶又稱果糖1,6二磷酸酯酶,催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,在糖的異生代謝和光合作用同化物蔗糖的合成中起關鍵性的作用。
測定原理
FBP催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,在反應體系中添加的磷酸葡萄糖異構酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下測定NADPH增加速率,即可計算FBP活性。
需自備的儀器和用品
分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
產品內容:
公司產品僅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
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FBP果糖1,6二磷酸酶檢測試劑盒微量法硝鉍(III) 五水合物 AR ,99.0%BOC-D-2- 98%CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原
硝鉍(III) 五水合物 ACS,≥98.0%BOC-D-4-溴 98%CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環化相關蛋白CAP-2抗原
硝鉍 CP,99.0%BOC-L-2-溴 98%TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor – Beta2) 轉移生長因子–β2(抗原)
硝鉍(III) 五水合物 ≥99.99% metals basisBOC-L-3,4-二氯 98%TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉移生長因子–β3(抗原)
硝鉍(III) 五水合物 ≥99.995% metals basisBOC-D-3,4-二氯 98%TGF- Beta R2 peptide 轉移生長因子β受體2(多肽抗原)
咖啡 98%BOC-L-2-氯 98%Thymosin Alpha-1 -Thymosin alpha-1)
咖啡 99%BOC-D-2-氯 98%Caspase-12 半胱蛋白蛋白-12(多肽)
咖啡 分析標準品4-溴-2-甲氧基 98%Caspase-12(hunman) 半胱蛋白蛋白-12抗原(人)
注意事項:
1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應當乘以稀釋倍數。
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