商品介紹：

測(cè)定意義

丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase，PC，EC 6.4.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、霉菌和酵母的線粒體中，催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，是糖異生過程的第一個(gè)限速酶，在保證血糖的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。

測(cè)定原理：

PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，蘋果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+，在340nm下測(cè)定NADH氧化速率，即可反映PC活性。

需自備的儀器和用品：

分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品內(nèi)容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存

試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。

NAD 標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

NADH 標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

操作步驟：

一、NAD+和 NADH 的提?。?/span>

1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>

NAD+的提?。喝?0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測(cè)。

NADH 的提?。喝?0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測(cè)。

2、組織中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測(cè)。

NADH 的提?。悍Q取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測(cè)。

3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>

NAD+的提?。菏占?500 萬細(xì)胞或細(xì)菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強(qiáng)度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測(cè)。

NADH 的提取：收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強(qiáng)度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。

2、反應(yīng)過程要注意避光。

3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí)，建議稀釋后測(cè)量，計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。

下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

膽囊收縮/腸促肽A受體(CCKAR)試劑盒 Human KIF1C ELISA Kit丁?；鵄合成3抗體

膽囊收縮/腸促肽B受體(CCKBR)試劑盒 Human KIF19 ELISA Kit脂肪源性亮基肽抗體（血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白）

膽囊收縮八肽(CCK-8)試劑盒 Human KIF20A ELISA Kit線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體

膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒Human KIF26B ELISA KitABL2蛋白抗體

著絲粒蛋白F(CENPF)試劑盒 Human KIF22 ELISA Kit血管緊張轉(zhuǎn)換ACE1抗體

膽乙酰化(CHAc)試劑盒  Human KIF2B ELISA Kit血管緊張轉(zhuǎn)換2抗體

膽磷甘油酯(PC/CPG)試劑盒 Human KIF2C ELISA KitAcinus抗體

蕈型膽受體M2(CHRM2)試劑盒Human KIF2A ELISA Kit醋激1抗體

硫軟骨(CS)試劑盒  Human KIF3A ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)(1-39)抗體

絨毛膜促性腺β(CGβ)試劑盒 Human KIAA0125 ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)ACTH(18-39)抗體

碳酐XII(CA12)試劑盒Human KIAA0087 ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)ACTH (7-23)抗體

染色盒同源物3(CBX3)試劑盒Human KIAA0141 ELISA Kit活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體

染色質(zhì)區(qū)解旋DNA結(jié)合蛋白3(CHD3)試劑盒Human KIAA0182 ELISA Kitα1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體

染色質(zhì)區(qū)解旋DNA結(jié)合蛋白5(CHD5)試劑盒Human KCTD5 ELISA Kitα1性糖蛋白2抗體（類粘蛋白2）

嗜鉻蛋白A/胰抑制(CgA/Pancreastatin)試劑盒  Human KIAA0430 ELISA Kit磷化水通道蛋白2抗體
PC丙酮酸羧化酶檢測(cè)試劑盒紫外分光光度法硝 68.0 - 70.0 %, 99.999% (metals basis)1-氯丁烷 99.8%IL-1 Beta (Rabbit Interleukin 1 Beta) ELISA Kit  兔白介1β

草 99.99% metals basis氯代異烷 GR,99%IL-6 (Rabbit Interleukin 6) ELISA Kit  兔白介6

草 ≥99.9999% (metals basis)氯代叔丁烷 99%IL-10 (Rabbit Interleukin 10) ELISA Kit  兔白介10

橙黃Ⅰ Biological stain氯代十六烷 97%TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit  兔子腫瘤壞死因子α

橙黃Ⅰ Indicator氯代異丁烷 98%TGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit  兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β

焦硫 99.99% metals basis氯代環(huán)己烷 99%bFGF (Rabbit basic fibroblast growth factor) ELISA Kit  兔子性成纖維生長(zhǎng)因子

硫氫 AR，99%氯代十四烷 98%PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2) ELISA Kit  兔子前列腺E2

硫氫 CP，99%氯代正烷 99%5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit  兔子5羥色