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貨號 | FS-01S63632 |
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產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
幾丁質酶檢測試劑盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | FS-01S63632 |
商品介紹:
測定意義
幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。
測定原理:
幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與DNS試劑反應產生棕紅色化合物,在540nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。
自備實驗用品及儀器
天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、甲苯(土壤樣品專用)和蒸餾水。
產品內容:
公司產品僅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
下列是公司正在熱銷的產品:
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幾丁質酶檢測試劑盒可見分光光度法亞甲基藍 Indicator乙銫 AR,99% metals basisAnti-IL-12R Beta1/CD212/FITC 熒光標記白介-12受體β1抗體IgG
紫脲銨 IND乙銫 99.9% metals basisAnti-IL-12R Beta2/FITC 熒光標記白介-12受體β2抗體IgG
乙甲酯 分析標準品,99.9%(GC)乙銫 99.99% metals basisAnti-IL-13/FITC 熒光標記白介13抗體IgG
2-甲基戊烷 Standard for GC, ≥99% (GC)無水氯化鋰 AR,99.0%Anti-IL-13Ra1/FITC 熒光標記白介-13受體a1抗體IgG
13X分子篩 60-80目,氣相、液相色譜柱乙鋅,二水 AR,99.0%Anti-IL-13Ra2/FITC 熒光標記白介-13受體a2抗體IgG
甲基百里香藍 AR氧化鋅 AR,99%Anti-IL-14/Taxilin alpha/FITC 熒光標記抗白介14抗體IgG
甲基百里香藍 Dye content 80 %硫鋅,七水 99.995% metals basisAnti-IL-15/FITC 熒光標記白介15抗體IgG
試劑 AR,98.0%式碳鋅 AR,57.5%Anti-IL-15R Alpha/FITC 熒光標記白介15受體α抗體IgG
注意事項:
1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應當乘以稀釋倍數。
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