產品屬性：

商品介紹：

測定意義

順烏頭酸酶（aconitase），三羧酸循環中的酶，催化檸檬酸轉變為異檸檬酸。檸檬酸本身不易氧化，在順烏頭酸酶作用下，通過脫水與加水反應，使羥基由β碳原子轉移到α碳原子上，生成易于脫氫氧化的異檸檬酸，為進一步的氧化脫羧反應作準備。

測定原理

ACO催化檸檬酸轉化成異檸檬酸，異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH，導致340nm處光吸收上升。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產品內容：

公司產品僅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存

試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。

NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。

NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。

操作步驟：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

2、組織中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

下列是公司正在熱銷的產品：

EB病清道夫受體BEBV

磷化信號轉導和轉錄激活因子3肽BPhospho-Stat3

HLAⅡ類組織相容性抗原，DPα1鏈抗菌肽HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain

主要組織相容性復合體Ⅱ類顆粒溶major histocompatibility complexⅡ

蘋果脫氫2富組蛋白Malate Dehydrogenase2

前列腺E合2球蛋白樣轉錄體受體Prostaglandin E Synthase 2

γ谷酰轉肽絲狀血球凝集gamma glutamyl transpeptidase

白細胞介6絨毛蛋白/埃茲蛋白Interleukin 6

透明質嗜環蛋白/親環AHyaluronic acid

Ⅳ型膠原肌養蛋白Collagen TypeⅣ

磷烯醇式丙酮羧激膠原凝集phosphoenolpyruvate carboxykinase

果糖-1,6-二磷伴侶蛋白10Fructose-1,6-Bisphosphatase

葡萄糖-6-磷纖調蛋白Glucose-6-phosphatase, catalytic

糖原合成鈣網蛋白Glycogen synthase

趨化因子配體3網膜ELISA Kit for ChemokineLigand 3
ACO順烏頭酸酶檢測試劑盒微量法乙鈉 98%穗花牡荊甙 分析標準品，≥98% Anti-LY-96/MD-2  MD-2蛋白抗體

硫代甜菜 12 98%桃葉珊瑚苷 分析標準品，≥98%Anti-Lysozyme  溶菌抗體

十二烷基硫鈉 97%，電泳白果內酯 分析標準品，≥99%Anti-Lyn  膜相關蛋白酪激Lyn抗體

十二烷基硫鈉 99.0%，超純級巴卡丁 III  分析標準品，≥99%Anti-Phospho-Lyn (Tyr507)  膜相關蛋白酪激Lyn抗體

硫代甜菜 8 98%松果菊苷 分析標準品，≥95% Anti-Phospho-Lyn (Tyr396)  磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體

硫代甜菜10 98%雪上一枝蒿甲 分析標準品，≥97%Anti-Phospho-Lyn (Tyr497)  磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體

二甲藍FF 80%雪上一枝蒿乙 分析標準品，≥98%Anti-LYVE-1  管內皮透明質受體抗體

10.0μL微量進樣器 尖頭菊苣 分析標準品，≥98%Anti-M2-PK/PKM2  酮激-M2抗體

注意事項：

1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。

2、反應過程要注意避光。

3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應當乘以稀釋倍數。