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脲原體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-08 16:52:48瀏覽次數:392次

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貨號 FS-P013710
脲原體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次公司正在出售的產品:Toll樣受體10(TLR10)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)OLIG1 (Oligodendrocyte transcription factor 1) ELISA KIT
花生四烯-12-脂加氧(ALOX12)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)OPHN1 (Oligophrenin-1) ELISA KIT
花生四烯-12-脂加氧(AL

產品屬性:

產品名稱:脲原體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
貨號:FS-P013710

規格:50次

分類:熒光定量PCR試劑盒

儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。

運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

QQ截圖20200511164444.jpg 

試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

實驗過程:

一、試劑準備

1. DNA模板

2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢:

1.    特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。

2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。

3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

乙酰轉移檢測試劑盒

紅生成檢測試劑盒

脂蛋白α檢測試劑盒

β淀粉樣蛋白檢測試劑盒

Tau蛋白檢測試劑盒

鉤端螺旋體檢測試劑盒

CD3D檢測試劑盒

皰疹病-1型檢測試劑盒

鉤端螺旋體IgM抗體檢測試劑盒

柯薩奇病A16IgG抗體檢測試劑盒

胰島原檢測試劑盒

糖化血紅蛋白A1c檢測試劑盒

糖化蛋白檢測試劑盒

血糖檢測試劑盒

脊髓灰質炎病IgG抗體檢測試劑盒
脲原體通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次血吸蟲Anti-TBX18 Antibody可溶性Endoglin檢測試劑盒

大鼠可溶性血管內皮蛋白C受體Anti-TBX15 Antibody可溶性E選擇檢測試劑盒

輪狀病抗原Anti-TBX18 Antibody可溶性FMS樣酪激1檢測試劑盒

大鼠角化因子/雙調蛋白Anti-TBX22 Antibody可溶性MHC-I鏈相關基因A檢測試劑盒

大鼠環苷Anti-TBX3 Antibody可溶性MHC-I鏈相關基因B檢測試劑盒

軍團抗原Anti-TCEAL1 Antibody可溶性OX40配體檢測試劑盒

大腸Anti-TBXT Antibody可溶性P選擇檢測試劑盒

大鼠白活化黏附因子Anti-TCEAL3 Antibody可溶性sCD146分子檢測試劑盒

使用方法:

一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。

1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。

8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。


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