詳細介紹
elisa kit elisa原理 人牛小腸堿性磷酸酶
產品名:人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
:021—60449724,
產品規格:48T/96T
保存條件:2-8℃
主要作用:研究使用
Elisa實驗假性結果分析
酶聯免疫吸附試驗(ELISA試驗)是醫學檢驗的免疫學檢驗方法之一,已經廣泛應用到對病原微生物的免疫學檢查試驗中。用ELISA法檢測乙肝病毒 感染者的血清標志物(兩對半)是目前zui常用的實驗室檢驗方法。和任何實驗室檢查方法一樣,ELISA存在少量的假性結果(假陽性、假陰性),對臨床診斷和 治療會有一定的影響。由于ELISA反應所測對象可以是抗原也可以是抗體,顯色反應對結果的陰性和陽性也有兩種不同的判斷,所以這里以顯色為陽性的模式為 例歸納其影響因素如下。
1 假陽性時可能是下列因素的影響
(1)操作的影響。超過規定量的加樣量,使臨界點附近的陰性成為假的陽性;洗滌過程中有溢出現象,使強陽性孔的反應液污染附近的陰性孔而出現假的陽性;洗 滌時間或次數不夠,使反應試劑殘留,出現假的陽性;使用污染的加樣吸頭或反應孔;反復使用的底物液被污染或受到強光照射時間長,也會出現假的陽性。
(2)患者自身的免疫情況特殊。有自身免疫疾病的患者血清中,其IgG抗體等特殊成分會在ELISA反應過程中有一定的吸附作用,發生假的顯色反應而出現假陽性。
(3)血清標本的影響。如冰凍標本的反復凍融、標本存放時間太長而長菌、標本溶血、高血脂的標本等等,均易出現假的陽性結果。
(4)酶標儀使用的影響。酶標儀是ELISA試驗反應結果所必要的儀器,但在使用過程中也要注意一個特殊情況。由于酶標儀是對反應孔進行垂直比色,當反應板底部有污物時,很容易出現假的吸光度高值,導致假的陽性結果的出現。
(5)判讀結果或登記、發報告時錯位,出現錯報的假陽性結果。
2 假陰性時可能是下列因素的影響
(1)試劑在生產線上,發生少見的“漏包”,或包被的抗原或抗體失活或活性不足。
(2)試劑的運輸、保管不當。如:運輸過程中溫度過高、保存試劑的環境不好,導致試劑中的標記物活性降低,或者中和試劑*失活。
(3)操作過程中的誤差,加樣中出現錯、少、漏的現象;加顯色劑速度慢,觀察時間遲,使褪色反應快的出現假的陰性;洗滌過程中,用力過猛、浸泡時間太長、反復洗滌次數太多,使反應產生的免疫復合物丟失。
(4)忽略臨界值血清的作用,在試驗中只做陽性對照,從而失去臨界點的控制,造成假陰性。
(5)判讀結果或登記、發報告時錯位,出現錯報的假陰性結果。
elisa kit elisa原理 人牛小腸堿性磷酸酶