人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（sTRAIL）ELISA試劑盒
    ：021—60449724， 
    使用前*閱讀說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理，能測量人 sTRAIL   ，只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。    
    【需要而未提供的試劑和器材】 
    1． 37℃恒溫箱。 
    2． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。 
    3． 自動(dòng)洗板機(jī)。 
    4． 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。 
    5． 蒸餾水，容量瓶等 
    6． 干凈的試管和Eppendof管。 
    【注意事項(xiàng)】 
    1. 從-20℃取出的試劑盒，在4℃解凍過夜。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻，避免解凍時(shí)出現(xiàn)的分層，否則會(huì)出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。 
    2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。 
    3. 配制各種試劑時(shí)，切記混勻！ 
    4. 用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。 
    5. 建議所有人IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測。 
    6. 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活！ 
    7. 為免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。 
    【洗板方法】 
    手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。 
    自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。 
    【樣品的準(zhǔn)備和保存】 
    樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存，且避免反復(fù)凍融。 
    血清——用干凈試管收集血液，室溫凝固2小時(shí)或4℃過夜，離心1000×g 10分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。 
    細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。 
    【樣品稀釋的一般原則】 
    用戶須查閱文獻(xiàn)了解標(biāo)本內(nèi)待測因子的含量，決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)，以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA試劑盒的*檢測范圍。樣品的稀釋應(yīng)有詳細(xì)記錄。 
    【試劑的準(zhǔn)備和保存】 
    A. 人IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋和使用：在使用前2小時(shí)內(nèi)準(zhǔn)備。將凍干品管內(nèi)加入1ml樣品稀釋液，*溶解后做倍比稀釋。 
    稀釋后的人IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品在2小時(shí)內(nèi)使用。 
    B．生物素標(biāo)記人IL-1β抗體工作液：在使用前2小時(shí)內(nèi)準(zhǔn)備。 
    1． 根據(jù)每孔需要0.1ml計(jì)算總的用量（實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml）。 
    2． 按10ul生物素標(biāo)記人IL-1β抗體加人IL-1β抗體稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。 
    C．親和素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC）工作液的準(zhǔn)備：在使用前1小時(shí)內(nèi)準(zhǔn)備。 
    1． 根據(jù)每孔需要0.1ml計(jì)算總的用量（實(shí)配時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml）。 
    2． 按10ul親和素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC）加ABC稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。 
    D. TMB顯色工作液的準(zhǔn)備：在使用之前30分鐘，按TMB顯色液A 9份加 TMB顯色液B 1份的比例配制TMB顯色工作液。 
    【操作程序】 
    1． 確定本次檢測所需的已包被人IL-1β抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。 
    2． 將倍比稀釋的人IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。 
    3． 酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng)90分鐘。 
    4． 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。 
    5． 將準(zhǔn)備好的生物素人IL-1β抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。 
    6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次，每次浸泡1分鐘左右。 
    7． 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。 
    8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次，每次浸泡1-2分鐘左右。 
    9． 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液，37℃避光反應(yīng)，反應(yīng)過程中，要經(jīng)常的觀察，當(dāng)肉眼可見人IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔差別不明顯時(shí)，即可加入TMB終止液0.1ml/孔。（顯色反應(yīng)zui長不要超過30分鐘）。 
    10． 用酶標(biāo)儀在450nm測定O.D.值。 
    11． 根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍，其實(shí)際濃度應(yīng)該×N。 
    【操作程序總結(jié)】： 
    準(zhǔn)備試劑，樣品和人IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品 
    加入準(zhǔn)備好的樣品和人IL-1β標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)90分鐘 
    洗板2次，加入生物素化人IL-1β抗體工作液，37℃反應(yīng)60分鐘 
    洗板3次，加入ABC工作液，37℃反應(yīng)30分鐘 
    洗板5次，加入TMB顯色液，37℃反應(yīng) 
    加入TMB終止液 
    30分鐘之內(nèi)讀OD值 
    計(jì)算標(biāo)本待測因子含量 
    【檢測范圍】：100pg/ml→1.56pg/ml。 
    【敏感性】： ＜0.2pg/ml 
    【特異性】： 系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)。 
    【保存】： -20℃ [短期內(nèi)（如兩周）可4℃ 
    【有效期】： 12個(gè)月（-20℃）。 
    【用途】： 用于體外定量分析液體標(biāo)本（通用型）。 
       人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（sTRAIL）ELISA試劑盒  上海恒遠(yuǎn)公司保證質(zhì)量（假一賠十）,科研,提供代測服務(wù),檢測目標(biāo): 人,小鼠,大鼠,豚鼠,豬,犬,兔,牛,羊,猴,兔,馬等動(dòng)物種屬。