人肝脂酶（HL）ELISA試劑盒
    ：021—60449724， 
    使用前*閱讀說明書。本酶聯免疫試劑盒是基于經典酶聯夾心技術原理，能測量人  HL    ，只能用于研究用途，不得用于醫學診斷。    
    【需要而未提供的試劑和器材】 
    1． 37℃恒溫箱。 
    2． 標準規格酶標儀。 
    3． 自動洗板機。 
    4． 單通道或多通道可調節移液器以及其吸頭。 
    5． 蒸餾水，容量瓶等 
    6． 干凈的試管和Eppendof管。 
    【注意事項】 
    1. 從-20℃取出的試劑盒，在4℃解凍過夜。盒內每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻，避免解凍時出現的分層，否則會出現濃度不均一的現象。 
    2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。 
    3. 配制各種試劑時，切記混勻！ 
    4. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。 
    5. 建議所有人IL-1β標準品、樣本都做雙份檢測。 
    6. 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活！ 
    7. 為免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和試管。 
    【洗板方法】 
    手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。 
    自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 
    【樣品的準備和保存】 
    樣品如果不立即分析，應分裝后冷凍保存，且避免反復凍融。 
    血清——用干凈試管收集血液，室溫凝固2小時或4℃過夜，離心1000×g 10分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。 
    細胞培養、組織勻漿、體液——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。 
    【樣品稀釋的一般原則】 
    用戶須查閱文獻了解標本內待測因子的含量，決定適當的稀釋倍數，以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA試劑盒的*檢測范圍。樣品的稀釋應有詳細記錄。 
    【試劑的準備和保存】 
    A. 人IL-1β標準品的稀釋和使用：在使用前2小時內準備。將凍干品管內加入1ml樣品稀釋液，*溶解后做倍比稀釋。 
    稀釋后的人IL-1β標準品在2小時內使用。 
    B．生物素標記人IL-1β抗體工作液：在使用前2小時內準備。 
    1． 根據每孔需要0.1ml計算總的用量（實際配制時應多配制0.1-0.2ml）。 
    2． 按10ul生物素標記人IL-1β抗體加人IL-1β抗體稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。 
    C．親和素-過氧化物酶復合物（ABC）工作液的準備：在使用前1小時內準備。 
    1． 根據每孔需要0.1ml計算總的用量（實配時應多配制0.1-0.2ml）。 
    2． 按10ul親和素-過氧化物酶復合物（ABC）加ABC稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。 
    D. TMB顯色工作液的準備：在使用之前30分鐘，按TMB顯色液A 9份加 TMB顯色液B 1份的比例配制TMB顯色工作液。 
    【操作程序】 
    1． 確定本次檢測所需的已包被人IL-1β抗體的酶標板孔數目。 
    2． 將倍比稀釋的人IL-1β標準品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔加入。 
    3． 酶標板加上蓋，37℃反應90分鐘。 
    4． 反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體；或甩去酶標板內液體，再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。 
    5． 將準備好的生物素人IL-1β抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應60分鐘。 
    6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次，每次浸泡1分鐘左右。 
    7． 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應30分鐘。 
    8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次，每次浸泡1-2分鐘左右。 
    9． 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液，37℃避光反應，反應過程中，要經常的觀察，當肉眼可見人IL-1β標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔差別不明顯時，即可加入TMB終止液0.1ml/孔。（顯色反應zui長不要超過30分鐘）。 
    10． 用酶標儀在450nm測定O.D.值。 
    11． 根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了N倍，其實際濃度應該×N。 
    【操作程序總結】： 
    準備試劑，樣品和人IL-1β標準品 
    加入準備好的樣品和人IL-1β標準品，37℃反應90分鐘 
    洗板2次，加入生物素化人IL-1β抗體工作液，37℃反應60分鐘 
    洗板3次，加入ABC工作液，37℃反應30分鐘 
    洗板5次，加入TMB顯色液，37℃反應 
    加入TMB終止液 
    30分鐘之內讀OD值 
    計算標本待測因子含量 
    【檢測范圍】：100pg/ml→1.56pg/ml。 
    【敏感性】： ＜0.2pg/ml 
    【特異性】： 系統和其它細胞因子無交叉反應。 
    【保存】： -20℃ [短期內（如兩周）可4℃ 
    【有效期】： 12個月（-20℃）。 
    【用途】： 用于體外定量分析液體標本（通用型）。 
        人肝脂酶（HL）ELISA試劑盒   上海恒遠公司保證質量（假一賠十）,科研,提供代測服務,檢測目標: 人,小鼠,大鼠,豚鼠,豬,犬,兔,牛,羊,猴,兔,馬等動物種屬。