詳細介紹
本公司質量保證:
檢測用所有試劑全部都為美國進口試劑,適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本,靈敏度*,多年專業酶免服務,我們保證對所售任何產品一概負責到底,每一份實驗結果都真實可靠!
產品名稱:人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒
人肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒
:021—60449724,
產品規格:96人份/48人份
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…多年專業酶免服務,質量保證,免費提供代測服務。
標本齊全:血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、關節液、胸腔溢液等…
保存條件:2-8℃
標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則:2瓶,使用前于6000-10000rpm離心30秒。每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以 上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為10 ng/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋10 ng/ml, 5 ng/ml, 2.5 ng/ml, 1.25ng/ml, 0.62 ng/ml, 0.32ng/ml, 0.16 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內配制,用完丟棄,下次檢測使用新鮮配置的標準品。
如配制5 ng/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)10 ng/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則:
打開瓶蓋前請離心,收集瓶壁上的溶液。臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔 100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時 內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:
打開瓶蓋前請離心,收集瓶壁上的溶液。臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每 孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
人肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒操作步驟
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。加樣時,槍頭應直接對準液面,切勿沿孔壁加樣。
加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。
每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。
依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。
依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等;貨源充足,現貨供應,保證質量,歡迎前來咨詢操作使用說明。