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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2016-12-28 21:51:27瀏覽次數(shù):206次
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人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
24834 * 含量測定 100204-200702 100mg
24835 雙香豆素 含量測定 100205-200701 100mg
24836 雙氰胺 TLC法檢查用 100206-200302 50mg
24837 * 含量測定 100208-200102 50mg
24838 * 含量測定 100209-201003 100mg
24839 * 含量測定 100210-201002 50mg
24840 辛可尼丁 檢查用 100211-200502 50mg
24841 溴甲貝那替嗪 檢查用 100212-199701 50mg
24842 乙羥* 檢查用 100215-200601 100mg
24843 鹽酸安他唑啉 含量測定 100216-200702 100mg
24844 * 含量測定 100218-199601 50mg
24845 * 含量測定 100219-199902 50mg
24846 * 檢查用 100221-200301 100mg
24847 鹽酸* 鑒別 100222-200702 50mg
24848 * 含量測定 100223-200102 50mg
24849 異* 含量測定 100224-200903 100mg
24850 * 含量測定 100225-200502 100mg
24851 半乳糖 含量測定 100226-200404 50mg
24852 醋酸去氧皮質(zhì)酮 供UV法含量測定 100227-201001 30mg
24853 醋酸* 含量測定 100228-199802 50mg
24854 * HPLC法含量測定 100229-200803 100mg
24855 * 含量測定 100230-200602 100mg
24856 果糖 含量測定 100231-200303 50mg
24857 * 含量測定 100232-200201 50mg
24858 環(huán)己胺 檢查用 100233-200301 100mg
24859 * 含量測定 100234-200502 100mg
24860 己內(nèi)酰胺 檢查用 100235-199701 50mg
24861 * 含量測定 100237-200702 100mg
24862 * 含量測定 100238-199701 50mg
24863 * 含量測定 100239-200702 100mg
24864 ■鹽酸士的寧 含量測定 100240-200701 100mg
24865 * 含量測定 100241-200503 100mg
24866 * 含量測定 100242-200402 50mg
24867 * HPLC法含量測定 100243-200401 50mg
24868 * 含量測定 100244-200502 50mg
24869 * 供UV法 100245-201001 1000mg
24870 * 含量測定 100246-201001 100mg
24871 *鈉 檢查用 100247-199601 50mg
24872 *12 含量測定 100248-200802 100mg
24873 * 含量測定 100249-200902 100mg
24874 * 含量測定 100251-200302 100mg
24875 亞*鈣 含量測定 100252-200703 100mg
24876 * 含量測定 100253-200201 50mg
24877 * 含量測定 100257-200903 100mg
24878 * 含量測定 100258-200904 100mg
24879 依他尼酸 檢查用 100259-199701 50mg
24880 * 含量測定 100260-200902 100mg
24881 鹽酸* 含量測定 100261-200802 100mg
24882 鹽酸* 含量測定 100262-200301 100mg
24883 * 含量測定人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 100263-200301 50mg
24884 * 含量測定 100265-200602 100mg
24885 鹽酸羥嗪 含量測定 100266-200201 100mg
24886 β-* 含量測定 100268-200401 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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