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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
34565 人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒 human toll-like receptor 2,TLR2 ELISA Kit 96T/48T
34566 人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒 human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 LISA Kit 96T/48T
34567 人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒 human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit 96T/48T
34568 人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒 human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit 96T/48T
34569 人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒 Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit 96T/48T
34570 人TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒 Human TU3A Protein ELISA Kit 96T/48T
34571 人電子轉移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒 Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit 96T/48T
34572 人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒 Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit 96T/48T
34573 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒 Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 96T/48T
34574 人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒 Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 96T/48T
34575 人T細胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒 Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit 96T/48T
34576 人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit 96T/48T
34577 人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit 96T/48T
34578 人尿素酶相關蛋白C(UreC)ELISA試劑盒 Human urease related protein C,UreC ELISA Kit 96T/48T
34579 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 96T/48T
34580 人錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒 Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit 96T/48T
34581 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒 Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit 96T/48T
34582 人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA Kit 96T/48T
34583 人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒 Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA Kit 96T/48T
34584 人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 Human NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit 96T/48T
34585 人*誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒 Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit 96T/48T
34586 人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒 Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit 96T/48T
34587 人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒 Human cecropin B,CecB ELISA Kit 96T/48T
34588 人抗菌肽(Att)ELISA試劑盒 Human Attacin,Att ELISA Kit 96T/48T
34589 人顆粒溶素(GNLY)ELISA試劑盒 Human granulysin,GNLY ELISA Kit 96T/48T
34590 人富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒 Human histatin 5,HTN5 ELISA Kit 96T/48T
34591 *樣轉錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒 Human Ig-like transcripts Receptor,ILTsR ELISA Kit 96T/48T
34592 人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒 Human filamentous hemagglutinin,FHA ELISA Kit 96T/48T
34593 人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒 Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA Kit 96T/48T
34594 人嗜環蛋白/親環素A(CyPA)ELISA試劑盒 Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 96T/48T
34595 人肌養蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒 Human dystrophin ELISA Kit 96T/48T
34596 人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒 Human Collectin ELISA Kit 96T/48T
34597 人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒 Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit 96T/48T
34598 人纖調蛋白(FMOD)ELISA試劑盒 Human fibromodulin,FMOD ELISA Kit 96T/48T
34599 人鈣網蛋白(CRT)ELISA試劑盒 Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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