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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
35391 大鼠抗內皮細胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 Rat anti-endothelial cell antibody,AECA ELISA Kit 96T/48T
35392 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 Rat intact Parathormone ,i-PTH ELISA Kit 96T/48T
35393 大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase,CIAP ELISA Kit 96T/48T
35394 大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 associated protein A,SP-A ELISA Kit 96T/48T
35395 大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒 Rat Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 96T/48T
35396 大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 Rat Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 96T/48T
35397 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒 Rat myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA Kit 96T/48T
35398 大鼠補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 Rat Complement 3,C3 ELISA Kit 96T/48T
35399 大鼠*(AZT)ELISA試劑盒 Rat Azidothymidine,AZT ELISA Kit 96T/48T
35400 大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒 Rat dopamine,DA ELISA Kit 96T/48T
35401 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒 Rat ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit 96T/48T
35402 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒 Rat Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit 96T/48T
35403 大鼠*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 Rat glutamic acid decarboxylase autoantibody,GAD-Ab ELISA Kit 96T/48T
35404 大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP) ELISA試劑盒 Rat Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit 96T/48T
35405 大鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 Rat anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit 96T/48T
35406 大鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 rat anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit 96T/48T
35407 大鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 Rat anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit 96T/48T
35408 大鼠apelin 12(AP12)ELISA試劑盒 Rat apelin 12,AP12 ELISA Kit 96T/48T
35409 大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 Rat Interferon α,IFN-α ELISA Kit 96T/48T
35410 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒 Rat rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 96T/48T
35411 大鼠*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit 96T/48T
35412 大鼠內毒素(ET)ELISA試劑盒 Rat endotoxin,ET ELISA Kit 96T/48T
35413 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒 Rat Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 96T/48T
35414 大鼠*A(CsA)ELISA試劑盒 Rat Cyclosporine A,CsA ELISA Kit 96T/48T
35415 大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 Rat high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 96T/48T
35416 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒 Rat β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M,β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit 96T/48T
35417 大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 Rat Endometrium Antibody,EMAb ELISA Kit 96T/48T
35418 大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 Rat LDL-IC ELISA Kit 96T/48T
35419 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 Rat 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA Kit 96T/48T
35420 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Rat Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
35421 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 96T/48T
35422 大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 Rat Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit 96T/48T
35423 大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 Rat α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit 96T/48T
35424 大鼠內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 Rat Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit 96T/48T
35425 大鼠*酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 Rat cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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