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PCR檢測方法以及注意事項2022/12/15
PCR反應的準備PCR反應體系10×擴增緩沖液10μl4種dNTP混合物(終濃度)各100~250μmol/L引物(終濃度)各5~20μmol/L模板DNA0.1~2μgTaqDNA聚合酶5~10UM...
如何獲得精準的Western Blot實驗結果?2022/12/14
蛋白質免疫印跡雜交實驗(WesternBlotting)是成熟mRNA翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中經典和廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然WesternBlot實驗原...
磷酸化蛋白WB做不好?你可能忽略了這些2022/12/14
WB是檢測和定量磷酸化蛋白質的重要實驗方法,然而大家一直都說磷酸化蛋白WB不好做!這是因為處于不同的細胞生長狀況和/或特定的細胞周期時,磷酸化蛋白可能僅占細胞總蛋白中的一小部分,處理不得當時,還會快速...
細胞培養用液的配制與消毒2022/12/13
一、器材與試劑:干粉型培養基、胰蛋/白酶,青/霉素、鏈/霉素.純凈水系統、電子天平、PH計、磁力攪拌器。具體步驟:(1)水的制備:細胞培養用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質。需要用新鮮的雙蒸水、...
表達蛋白的生物學活性的檢測2022/12/13
一、MTT比色法檢測細胞活性(一)原理活細胞內線粒體琥珀酸脫氫酶能催化無色的MTT形成藍色的甲肷,其形成的量與活細胞數和功能狀態呈正相關。對細胞活力有影響的表達蛋白活性檢測可以通過MTT比色法進行。(...
蛋白質形成凝膠的兩種類型和機理2022/12/12
蛋白質凝膠的形成可以定義為蛋白質分子的聚集現象,在這種聚集過程中,吸引力和排斥力處于平衡,以至于形成能保持大量水分的高度有序的三維網絡結構或基體。如果吸引力占主導,則形成凝結物,水分從凝膠基體排除出來...
凝膠過濾層析的優點及使用方法2022/12/12
優點它的突出優點是層析所用的凝膠屬于惰性載體,不帶電荷,吸附力弱,操作條件比較溫和,可在相當廣的溫度范圍下進行,不需要有機溶劑,并且對分離成分理化性質的保持有獨到之處。對于高分子物質有很好的分離效果。...
分享幾種微生物實驗中常用的稀釋劑2022/12/9
大多數細胞都適合在pH值7.2-7.4范圍內生長,當然不同種類細胞對pH值的要求也不盡一致,同一種細胞在不同生長時期的最適pH值也有所不同。原代培養細胞對pH值要求較嚴,傳代培養細胞對pH值要求較寬。...
雙向電泳樣品緩沖液選用的基本原則2022/12/9
1、蛋白質樣品的特征:復雜,含鹽或其他污染物易被蛋白酶降解動態范圍寬(X106)溶解性不均一(疏水性/親水性)分子量、等電點的范圍寬(10-500KDa,pH2-14)2、樣品分離的基本要求:高靈敏度...
采血后血清分離膠管的使用流程2022/12/8
為了發展血液檢測技術,有效提高效率,很多實驗室通常會選擇添加了試劑的真空試管,例如:血清分離膠管、促凝劑管、抗凝劑管等。其中分離膠管的應用是常規采血質量的重要保障,不僅減少了檢測結果的誤差性,還避免了...
生物緩沖液該如何選擇?2022/12/8
生物緩沖液類型眾多,有Tris、Bicine、Caps等,生產這些緩沖劑的廠家也有很多,作為采購者,承擔公司的重任,既需要找到價格/優惠也要找到質量過硬的廠家,那么,可以從哪些方面去尋找選擇呢呢?大家...
空白試驗和加標回收率的相關知識匯總!2022/12/7
一、空白實驗1.空白實驗的定義空白實驗(空白測定)指除用水代替樣品外,其它所加試劑和操作步驟均與樣品測定完/全相同的操作過程??瞻讓嶒瀾c樣品測定同時進行。2.空白實驗值樣品分析的響應值(如吸光度、峰...
實驗室溶劑正確回收方法!2022/12/7
在實驗室里,常常使用三氯/甲烷、四氯化碳和石油醚等有機溶劑。這些試劑化學性質不活潑、不助燃,與酸、堿不起作用,處理起來比較困難。由于其易揮發,且具有一定的毒性,污染環境,因此正確回收不僅能夠保護環境,...
紫外可見分光光度計使用中常見問題2022/12/6
分光光度計是實驗室里最/常用的一種理化分析儀器,本文就分光光度計在使用過程中出現的幾個常見問題,如儀器的預熱、波長準確度的檢查與校正、吸收池的使用方法、吸光度測定重復性等問題進行分析,并提出解決這些問...
微量分光光度計和普通分光光度計有什么區別2022/12/6
傳統分光光度計:1、樣品體積要求大,絕大部分要50μL以上2、需使用比色皿3、每次換樣品時,比色杯需要清洗,工作繁重4、光程一般為10mm,樣品需要稀釋,測量濃度范圍小5、燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈...

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