細胞:HCoEpiC細胞
中文名稱:人正常結腸上皮細胞
生長特性:貼壁
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養基,或自己配置的新鮮培養基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時)。
HCoEpiC細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
牛流行熱病毒(BEFV)核酸檢測:
實驗目的:用于檢測發病動物血液、呼吸道分泌物試子及組織臟器(肺臟及淋巴結等) 或病毒培養液中牛流行熱病毒(BEFV)RNA,適用于牛流行熱病毒(BEFV)感染的輔助診斷及流行病學調查,其檢測結果僅供參考。
實驗原理:本試劑盒選取一對牛流行熱病毒(BEFV)特異性引物和一條特異性熒光探針,應用Trizol提取RNA,經逆轉錄酶作用將RNA轉錄成cDNA,后者在Taq酶作用下,配以FQ-Buffer(內含Mg2+、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體(dNTPs)等成分,用一步PCR-熒光探針體外擴增法對牛流行熱病毒(BEFV)RNA進行擴增,從而達到快速檢測之目的。
實驗組成:
(RNA提取液B 1管 500μl/管)(逆轉錄酶系 1管 40μl/管)(Taq酶系 1管 40μl/管)
(BEFV -PCR MIX 1管 800μl/管)(BEFV陽性質控品 1管 50μl/管)(陰性質控品 1管 500μl/管)
(DEPC水 1管 2000μl/管)
備注: RNA提取液A(Trizol Reagents)等另行配備。