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panc02細胞(小鼠胰腺癌細胞)

時間:2024/5/27閱讀:496
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細胞:panc02細胞

中文名稱:小鼠胰腺癌細胞

生長特性:貼壁

培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)

凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO

panc02細胞傳代:

1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。

2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;

(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)

直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。

3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。

4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

收到細胞后請盡快更換配套培養基,或自己配置的新鮮培養基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時)。

 

(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)

第二代iPS方法,其中已經有一些表現出了更好的安全性。逆轉錄病毒的可重復性和簡便性,使其依然活躍在體外研究中。然而在再生醫學領域,附加體型載體(episomal plasmid)更受青睞。

(人SW579細胞 來源:通派細胞庫 人甲狀腺鱗癌細胞)(人H292細胞 來源:通派細胞庫 人肺癌細胞)

其他方法還包括腺病毒、仙臺病毒、合成蛋白和RNA。不過,這些方法盡管更為安全,但技術要求比較高,對重編程效率也并無改善。研究顯示,僅通過小分子就可完成細胞重編程。這意味著,間接靶標與多能性有關的分子通路,就足以重新決定細胞的命運。

(鼠CHO-K1細胞 來源:通派細胞庫 倉鼠卵巢細胞)(人ZR-75-1細胞 來源:通派細胞庫 人乳癌細胞)

理解上述分子通路,可以幫助人們防止已進入多能狀態的細胞回到已分化狀態。多能細胞和已分化細胞之間,存在DNA甲基化和組蛋白乙酰化的差異。另外,靶標表觀遺傳學機制的小分子,能夠提升重編程效率。總的來說,在提升重編程效率的工作中需要特別注意表觀遺傳學因子的改變。

(小鼠MC3T3-E1 Subclone 14細胞 來源:通派細胞庫 小鼠顱頂前骨細胞亞克隆細胞)

將多能性的iPSC分化成為人們想要的細胞類型,必須對許多因子加以控制。有些iPSC克 隆在分化時存在一定的偏好。對于醫學應用來說,也許不將細胞逆轉得會更好。

(小鼠3T3-L1細胞 來源:通派細胞庫 小鼠胚胎成纖維細胞)(大鼠SHZ-88細胞 來源:通派細胞庫 大鼠乳癌細胞)

實際上,研究者們已經在沒有到達多能性狀態的情況下,成功將體細胞 重編程(有時甚至只用到了一個外源轉錄因子)。值得注意的是,這些被稱為直接重編程的技術,需要的基因組改變要少于傳統的 iPS技術,在模擬疾病方面很有潛力。



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