細(xì)胞：AU565細(xì)胞

中文名稱：人乳腺癌細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

AU565細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ魕i酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

長期以來相信雌性哺乳動(dòng)物生來就具有有限的卵母細(xì)胞，并且不能補(bǔ)充。（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：HSF細(xì)胞）成年小鼠的卵巢能更新卵母細(xì)胞。那些更新卵母細(xì)胞來源血液循環(huán)中的干細(xì)胞，并且這些干細(xì)胞來源于骨髓。

如果該假設(shè)得到證實(shí)，將總體上扭轉(zhuǎn)我們的想法。（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：P815細(xì)胞）為了研究清楚循環(huán)細(xì)胞（circulating cells）是否會(huì)轉(zhuǎn)變成成熟的卵母細(xì)胞，利用外科手術(shù)將野生型小鼠和能表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的小鼠聯(lián)結(jié)構(gòu)成連體小鼠——連體小鼠共用一個(gè)循環(huán)系統(tǒng)。

這對(duì)連體小鼠在年齡為4-8周的時(shí)候被聯(lián)結(jié)在一起，（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：HSC細(xì)胞）并且連體持續(xù)6-8個(gè)月。之后正如預(yù)想的那樣，連體小鼠中的每個(gè)成員均具有g(shù)fp陽性和野生型血液細(xì)胞。

研究者誘導(dǎo)小鼠排卵，然后收集排出的卵母細(xì)胞，（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：HSG細(xì)胞）他們發(fā)現(xiàn)野生型小鼠中沒有GFP陽性的卵母細(xì)胞，反過來也一樣。

發(fā)現(xiàn)一些與卵母細(xì)胞關(guān)聯(lián)的細(xì)胞來源于另外的連體伙伴。（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：HSY細(xì)胞）對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行染色，均為CD45陽性。

研究者重復(fù)他們的實(shí)驗(yàn)，（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：A2780細(xì)胞）所不同的是預(yù)先用化療處理小鼠，觀察是否骨髓、卵巢的受傷，或者精仔細(xì)胞能夠誘導(dǎo)卵母細(xì)胞的再生。

他們?cè)僖淮伟l(fā)現(xiàn)沒有GFP陽性細(xì)胞交叉進(jìn)入野生型伙伴中去成為成熟的卵母細(xì)胞。（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：HL60細(xì)胞）研究將GFP轉(zhuǎn)基因細(xì)胞骨髓移植給野生型小鼠，這些小鼠是預(yù)先用化療藥物或者低劑量的放射性處理消毒的。

在這些野生型小鼠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)GFP陽性血液細(xì)胞，（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：GC-2細(xì)胞）但沒有發(fā)現(xiàn)GFP陽性卵母細(xì)胞。

很有可能起源于骨髓的不成熟的卵母細(xì)胞有助于卵巢營造一個(gè)排卵所必需的內(nèi)分泌環(huán)境。（通派細(xì)胞庫供應(yīng)：C26細(xì)胞）用化療處理的小鼠的研究結(jié)果不同意這種推測(cè)，因?yàn)椴贿^是連體還是骨髓移植，都不能增加內(nèi)源性的排卵。