細(xì)胞：ARPE-19細(xì)胞
中文名稱：人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
ARPE-19細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）
1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
核轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中，另一類蛋白質(zhì)具有GLFG氨基酸結(jié)構(gòu)，如Importin α、Importin β、CRM1、CAS蛋白等均直接參與生物大分子的出入核轉(zhuǎn)運(yùn)，統(tǒng)稱為親核素家族（Karyopherins），（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：Huvec細(xì)胞株）在這個(gè)家族中還有Kap123p、Pse1p和transportin等，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)上百個(gè)親核素家族成員。CRM1蛋白較為特殊，除具有保守的NES導(dǎo)向序列外，同時(shí)也是親核素家族中的一員。
每個(gè)家族成員都有各自相應(yīng)的生物學(xué)功能，如Importin α與NLS蛋白相連；Importin β與Importin α相連；CAS蛋白作為Importin α連接子，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：CNE-2細(xì)胞株）參與Importin α返回細(xì)胞質(zhì)；Kap123p和 Pse1p參與mRNA出核RNP蛋白的再入核過(guò)程；
CRM1結(jié)合mRNA和Rev并促進(jìn)mRNA的出核。近年發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)運(yùn)子（transportin）能識(shí)別M9信號(hào)肽，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：Sw1990細(xì)胞株）兼有識(shí)別經(jīng)典核轉(zhuǎn)運(yùn)途徑中NLS結(jié)構(gòu)和參與Importin β轉(zhuǎn)運(yùn)導(dǎo)向的雙重作用。
生物大分子細(xì)胞核轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程具有重要的醫(yī)藥學(xué)研究?jī)r(jià)值。在血管緊張素II刺激大腦神經(jīng)細(xì)胞反應(yīng)中細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Stat3，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：MEF細(xì)胞株）首先須進(jìn)行入核轉(zhuǎn)運(yùn)，這一過(guò)程已經(jīng)闡明，這對(duì)于深入了解高血壓時(shí)神經(jīng)細(xì)胞的作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ)；
在惡性骨髓瘤遺傳性染色體顛倒異位研究中發(fā)現(xiàn)核孔素NPU98基因與RNA解旋酶基因之間出現(xiàn)融合現(xiàn)象；（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：SP2/O細(xì)胞株）同時(shí)入核轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程的研究為核靶向轉(zhuǎn)運(yùn)新藥的設(shè)計(jì)提供了新的思路。綜上說(shuō)明，細(xì)胞核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程及機(jī)制的研究具有重要的醫(yī)藥學(xué)價(jià)值。
