大鼠骨髓瘤細胞IR983F細胞特性
現代病毒研究往往需要大量的純病毒粒子，以便于化學研究或制備抗體。在這里我們簡明地描述一下脊髓灰質炎病毒（Polio virus）的純化步驟。它是一種已被廣泛研究的危害人體健康的病毒。
在開展人體病毒實驗工作以前，讓實驗工作人員獲得抵抗這種病毒的免疫力是非常必要的。脊髓灰質炎病毒疫苗很容易獲得，大多數工作人員可能已經獲得免疫，但重新免疫是必要的預防措施。
病毒的純化步驟主要是：1.在大規模的裝置中培養病毒；2.去除富含病毒培養液；3.通過沉淀將病毒濃縮；4.通過密度梯度離心zui終純化病毒。現在我們講解每個步驟的一些細節。
大鼠骨髓瘤細胞IR983F細胞特性
小鼠淋巴瘤細胞(NK靶細胞)YAC-1
小鼠單核巨噬細胞J774A.1
小鼠T淋巴瘤細胞Cyc-Tag(S49)
小鼠血細胞WEHI-3
小鼠B淋巴細胞WEHI 231
小鼠淋巴細胞白血病L1210
小鼠T淋巴細胞Cl.Ly1+2-/9
小鼠淋巴瘤細胞P388D1(IL-1)
小鼠漿細胞瘤MPC-11
小鼠睪丸支持細胞（PyTL基因修飾）15P-1
小鼠T淋巴瘤細胞E.G7-OVA
小鼠巨噬細胞Ana-1
小鼠淋巴瘤細胞EL4
小鼠淋巴瘤細胞EL4.IL-2
小鼠白血病細胞L1210
小鼠淋巴瘤細胞L5178Y TK+/-clone(3.7.2C)
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞RAW 264.7
小鼠淋巴瘤細胞P388D1
大鼠肺泡巨噬細胞NR8383
大鼠氣管上皮細胞RTE
大鼠肺成纖維樣細胞RL1
大鼠肺細胞WTRL1
大鼠胸大動脈平滑肌細胞A7r5
大鼠心肌細胞H9c2(2-1)
大鼠肝細胞瘤H-4-Ⅱ-E
大鼠肝細胞IAR20
大鼠肝細胞瘤H4-Ⅱ-E-C3
大鼠肝細胞BRL
大鼠肝細胞BRL 3A
大鼠肝癌細胞RH-35
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞PC-12
正常大鼠腎細胞NRK
大鼠腎小球系膜細胞HBZY-1
大鼠腎細胞RK1
大鼠腎細胞NRK-52E
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)PC-12
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)PC-12
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)PC-12
大鼠垂體瘤細胞GH3
大鼠腦膠質瘤細胞C6
大鼠雪旺細胞RSC96
大鼠骨髓瘤細胞Y3-Ag1.2.3
大鼠纖維母細胞1/EJ 1-1
大鼠皮膚成纖維樣細胞RS1
大鼠肌肉成纖維樣細胞RM1
大鼠骨髓瘤細胞IR983F
1.在大型裝置中培養細菌。為獲得足夠的用于化學研究的病毒，必須制備大量病毒。每種病毒的培養都有不同的步驟。脊髓灰質炎病毒是在人或靈長類動物細胞系中培養的，可以培養在一大瓶中沿壁生長的單層細胞上，也可以在一個輕輕攪拌的細胞懸液中。在有利病毒生長的條件下，每個宿主細胞能生產10～1000的感染單位的病毒，即每毫升一個感染單位的滴度（或稱效價）。
2.富含病毒培養液的去除。病毒的生長和釋放伴隨著細胞的破損。在病毒復制完成的時候，培養液中大多數細胞已經變成了細胞碎片。為使所有病毒分子*釋放，要通過反復冷凍—融化的循環過程使細胞進一步破碎。然后將富含病毒的液體從培養瓶轉移到離心試管中。低速離心除去大分子的細胞殘骸。
3.通過沉淀將病毒物質濃縮。由于病毒是蛋白質性質的，它們能通過蛋白質沉淀法沉淀。脊髓灰質炎病毒可通過高濃度的NH4Cl（每毫升培養液中加0.4g）沉淀下來。這一過程要在低溫下進行，NH4Cl要在攪拌下緩慢加到培養液中。由于病毒蛋白沉降，溶液將變得渾濁。將沉淀物通過低速離心（2000g，1-2hr）。然后將含有病毒分子的沉淀物在少量磷酸鹽緩沖液中再次懸浮培養。這一步驟可濃縮病毒大約10倍，99％以上的病毒粒子可沉淀回收。
4.通過密度梯度離心zui終純化病毒。脊髓灰質炎病毒可以通過蔗糖或CSCl的密度梯度離心純化。在后者中，病毒在離心試管中成為一個分離帶，這一過程與對DNA的分離相同，離心須要高速，即120000g,且要進行好幾個小時，是一整夜。離心管中的液體通過試管底部的一點點滴出來，要檢測每一滴的病毒滴度。在合適的離心條件下，所有的病毒分子都集聚在一或兩個組分中，所以它們是非常純的。結晶脊髓灰質炎病毒。如果能在合適的條件下濃縮大量且高純度的病毒，就可以獲得病毒晶體。這種晶體為化學分析提供了很好的材料，且易于通過X射線衍射技術進行結構分析。
本章的部分講到的脊髓灰質炎病毒的計算機擬合就是從這種高濃度脊髓灰質炎的病毒晶體獲得的。
