ELISA試劑盒試驗前做好對照很首要
ELISA試劑盒試驗固相載體的選擇：很多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。
包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，懇求純度要好,吸附時通常懇求PH在9.0～9.6之間。
吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,通常多選用4℃ 18～24小時。
有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應留心防護。
其方法可所以凹孔平板、試管、珠粒等。
如今常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。
不管何種載體，在運用前均可進行選擇：用等量抗原包被，在同一試驗條件下進行反應，查詢其顯色反應是不是均一性，據此判明其吸附功能是不是出色。
正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證試驗作用的性。
試驗條件的選擇
在ELISA中，進行各項試驗條件的選擇是很首要的，其間包括:
有條件者應運用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是如今較為滿意的供氫體。
底物作用一段時間后，應參與強酸或強堿以中止反應。
通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。
底物運用液有必要新鮮，尤其是H2O2在臨用前參與。
然后再固定其它條件或采納“方陣法”（包被物、待檢樣品的參看品及酶符號抗體分別為不一樣的稀釋度）在正式試驗系統里地滴定其工作濃度。
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