elisa檢測試劑盒實驗要注意的重要事項
神經特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒血清：樣本室溫放置2小時或4℃過夜后取上清；血漿：可用EDTA、枸櫞酸鈉或肝素作為抗凝劑（根據試劑盒要求選擇），樣本加入10%抗凝劑混合10-20分鐘，2000-3000轉/分離心20分鐘后取上清；尿液、胸水、腹水、腦積液等：2000-3000轉/分離心20分鐘
特別提醒：
1.取樣和存樣所用的凍存管、離心管、吸頭等需高溫滅菌處理；2.所有存樣管口需以封口膜封好；3.所有樣品管壁需要用防水記號筆清晰標明編號（便于區分即可）；4.所有樣品避免反復凍融5.如有特別要求，請與服務該區域的講明。
在神經特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒實驗中，選擇好各項ELISA實驗條件是很重要的，其中包括:(1) 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的*適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
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