elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

將目標(biāo)抗體包被于微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入微生物化的目標(biāo)抗體，將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

elisa檢測(cè)試劑盒反應(yīng)步驟:

（1）嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。

（2）加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。

（3）封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。 

（4）用洗板機(jī)洗板時(shí)，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，ELISA試劑盒這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。

（5）合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

（6）加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

（7）顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

（8）加樣時(shí)保持顯色劑不外流；A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

（9）應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔，整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。elisa檢測(cè)試劑盒從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):

在收集標(biāo)本前必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成分是否足夠穩(wěn)定，我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè)，對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，請(qǐng)及時(shí)儲(chǔ)存在4℃的條件下備用，如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本，請(qǐng)?jiān)谠炷Ｈ〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保持。因冰室與室溫存在一定的溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，所以請(qǐng)避免反復(fù)凍融。有代測(cè)需求的客戶，取材前請(qǐng)務(wù)必和我司銷售人員索要說明書，具體操作事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員保持溝通。