pUC18 和 pUC19質粒圖譜

pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ，是zui常用的質粒載體，其結構組成緊湊，幾乎不含多余的 DNA 片段，GenBank注冊號為 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而來，其中 lacZ (MSC)來自 M13mp18/19 圖 3-4 是其質粒圖譜 。

這兩個質粒的結構幾乎是*一樣的，只是多克隆位點的排列方向相反。這些質粒缺乏控制拷貝數的 rop 基因，因此其拷貝數達 500-700 。 pUC 系列載體含有一段 lacZ 蛋白氨基末端的部分編碼序列，在特定的受體細胞中可表現 α-互補作用。因此在多克隆位點中插入了外源片段后，可通過 α-互補作用形成的藍色和白色菌落篩選重組 質粒。

特征序列區位：

&NBS p;

NOS terminator sequence:

ggatccatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttgtttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacacgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagtaatcgat

設計引物：

Forward primer: 5’ ggaGGATCCggatccatcgttcaaac 3’ (含BamH I 位點GGATCC及三個保護堿基)

Reverse primer: 5’ atcGAATTCATCGATTACTAGTAACATAG 3’ (含EcoR I 位點GAATTC及三個保護堿基)

請查一下NOS終止子序列內有沒有這兩個酶切點。如果沒有，引物合成后，以任何一種pCAMBIA為模板都能擴增到該終止子序列。