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規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫/2-8℃ | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 合肥萊爾生物科技有限公司 | 訂購方式 | 聯系客服 |
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木質素(Lignin)檢測試劑盒紫外分光光度法說明書(含標準品),注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
貨號:YX-C-B636
規格:50T/48S
產品內容:
試劑一:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
標準品:粉劑×1 支,50mg 木質素,4℃保存。臨用前加入 1mL 高氯酸,充分混勻溶解,配成50mg/mL 的標準液。
產品說明:
木質素是構成植物細胞壁的成分之一,具有使細胞相連的作用。木質素存在于木質組織中,主要作用是通過形成交織網來硬化細胞壁,為次生壁主要成分。木質素中的酚羥基發生乙?;笤?nbsp;280nm 處有特征吸收峰,280nm 的吸光值高低與木質素含量正相關。
木質素(Lignin)檢測試劑盒試驗中所需的儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、1mL 石英比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、EP 管、封口膜、高氯酸、冰乙酸和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品處理:
樣品 80℃烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩,稱取約 5mg 于 1.5mL EP 管中。
二、測定步驟:
1、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 280nm,冰乙酸調零。
2、操作表:在 1.5mL 玻璃試管依次加入下列試劑:
| 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣品(mg) | 5 | - | - |
試劑一(µL) | 500 | 500 | 500 |
高氯酸(µL) | 20 | - | 20 |
標準液(µL) | - | 20 | - |
封口膜密封,充分混勻。于 80℃水浴鍋水浴 40min,進行乙酰化。每隔 10min 震蕩一次, 然后自然冷卻。 | |||
試劑二(µL) | 500 | 500 | 500 |
充分混勻后于常溫 8000g 離心 10min,取上清。 | |||
上清液(µL) | 20 | 20 | 20 |
冰乙酸(µL) | 980 | 980 | 980 |
測定 280nm 下的吸光值 A,記為 A 測定管、A 空白管、A 標準管,計算△A=A 測定管-A 空白管、△A 標準=A 標準管-A 空白管。 |
木質素(Lignin)檢測試劑盒三、木質素含量計算:
C 標準=C 原液×V 標準÷V 乙?;?times;V 上清÷V 檢測=0.0196 mg/mL
木質素(mg/g)= △A÷(△A 標準÷C 標準)×V 檢測÷(W×V 上清÷V 乙酰化)
= 0.9996×△A÷△A 標準÷W
C 標準:標準液在最終檢測體系中的濃度,0.0196 mg/mL;C 原液:標準液濃度,50mg/mL;V 標準:加入的標準液的體積,0.02mL;V 乙酰化:乙?;磻w積,1.02mL;V 上清:上清液體積, 0.02mL;V 檢測:檢測反應總體積,1mL; W:樣本質量,g。
注意事項:
1、試劑一有毒性,請操作時做好防護措施,加熱前必須用封口膜密封,以防氣體溢出。
2、加熱過程中有劇烈反應,震蕩時輕搖,以免壓力過大噴出造成人身傷害。
3、冰乙酸具有強刺激性,建議操作過程全部在通風櫥內操作。
木質素(Lignin)檢測試劑盒4、取上清加冰乙酸步驟根據自己樣品乙?;潭?,冰乙酸的用量可調整,保證吸光值在 0.1-0.8 之間即可,并在公式中參與計算。
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