當前位置:上海撫生實業有限公司>>技術文章>>PCR反應液的污染消除方法
對于PCR反應液的污染,可采取以下方法消除:
1. DNase I 法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室溫反應30min后加熱滅活,然后加入模板和Taq聚合酶進行正常PCR擴增。
2. 內切酶法:選擇識別4個堿基的內切酶(如MspI和TaqI等),可同時選擇幾種,以克服用一種酶只能識別特定序列的缺陷,室溫作用1h后加熱滅活進行PCR。
3. 紫外照射法:未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液進行紫外照射,注意事項與方法同上述UV照射法。
4. 尿mi 啶糖苷酶(UNG)法:用dUTP代替dTTP,使PCR產物中摻入大量dU。在再次進行PCR擴增前,用UNG處理PCR混合液即可消除PCR產物的殘留污染。由于UNG在PCR循環中的變性一步便可被滅活,因此不會影響含dU的新的PCR產物。
總之,靈敏度越高的PCR反應越容易出現PCR污染。采用適當的措施消除污染,可以避免重復實驗和浪費試劑,也使得實驗結果更加可靠而精準。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,智慧城市網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。