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貨號(hào)	FS-02R6399

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱：馬、驢源性快速檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管
貨號(hào)：FS-02R6399

規(guī)格：48T 0.1PCR管

分類：PCR-熒光探針?lè)?/span>

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

QQ截圖20200511164444.jpg

試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、樣品稀釋液：1×20ml。

4、檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。

2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

二甲 98%甲基烯酰氧基三(基硅氧烷基)硅烷 97%表皮生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒

間二甲 98%2,6-二羥基喹啉 90%總表皮生長(zhǎng)因子受體檢測(cè)試劑盒

乙二乙乙酯 AR,98%乙鈉 96%表皮生長(zhǎng)因子受體2檢測(cè)試劑盒

單乙 99%乙鈉 20% w/w乙溶液氨氨基轉(zhuǎn)移檢測(cè)試劑盒

乙二甲 standard for GC, ≥99.5% (GC)甲鈉 97%二檢測(cè)試劑盒

乙二甲 CP甲鈉溶液 30 wt%甲溶液酮檢測(cè)試劑盒

乙二甲 AR檸檬鉍銨 99%酮激M2型同工檢測(cè)試劑盒

乙二甲 >99.5%(GC)硫鉍 AR,99%酮脫氫激1檢測(cè)試劑盒

乙二甲 ACS硫化亞銅 85-90%，工業(yè)級(jí)型肝炎IgG抗體檢測(cè)試劑盒

乙二甲分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.9%(GC)氧化亞銅 AR,95.0%型肝炎病檢測(cè)試劑盒

乙二甲光譜純,>99.7%(GC)硫化銅 AR,99.0%波形蛋白檢測(cè)試劑盒

乙二甲色譜純,>99.7%(GC)亞碲 99.5%玻連蛋白;體外粘連蛋白檢測(cè)試劑盒

乙二甲用于氨基分析,>99.7%(GC)亞碲鈉 97%補(bǔ)體H因子相關(guān)蛋白1檢測(cè)試劑盒

二乙二二甲 >99.0%(GC) AR,98%補(bǔ)體蛋白3檢測(cè)試劑盒

二乙二二甲 ≥99.5% (GC)0.99補(bǔ)體蛋白4檢測(cè)試劑盒
馬、驢源性快速檢測(cè)試劑盒48T 0.1PCR管微量可調(diào)移液器P50甲氨基乙鹽鹽DNA甲基轉(zhuǎn)移3L抗體

3-羥基甲氨基乙鹽鹽二肽基肽10抗體

2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二羧鈉Leptin Fragment 116-130 Amide mouse二肽氨基肽3抗體

人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1（TRAIL-R1）ELISA試劑盒,1,3-雙(2,6-二異基)咪唑啉酮-2-亞基DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體

人胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3（IGFBP-3）ELISA試劑盒,1,3-雙(2,6-二異基)咪唑啉酮-2-亞基B淋巴轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白DRIL1抗體

人腸三葉因子（ITF）ELISA試劑盒,ITF ELISA kit4-氨基-2,6-二吡啶轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體

人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1（AFP-L1）ELISA試劑盒,AFP-L1 ELIS4-氨基-2,6-二吡啶核糖核3/Drosha抗體

人單核增多性李斯特菌O（（LLO）ELISA試劑盒,1-甲酰哌啶脫氧胸激DTYMK抗體

使用方法:

一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。