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當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR快速檢測試劑盒>>PCR-熒光探針法/PCR法>> 雞源性快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-04-02 10:24:07瀏覽次數(shù):373次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)創(chuàng)傷弧菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
貨號 | FS-02R6394 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:雞源性快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管 規(guī)格:48T 0.2PCR管 分類:PCR-熒光探針法 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 |
試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔) 2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。 3、 樣品稀釋液:1×20ml。 4、 檢測稀釋液A:1×10ml。 5、 檢測稀釋液B:1×10ml。 |
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
2,4-二-5-甲基嘧啶 98%番瀉葉A 分析標準品,≥96%白介2受體檢測試劑盒
2-羥基嘧啶鹽鹽 98%番瀉B 分析標準品,≥97%(HPLC)白介受體相關激檢測試劑盒
2,4,6- 95%菝葜皂元 分析標準品,≥98%白三烯B4檢測試劑盒
阿拉伯樹膠 醫(yī)藥級知母皂A-Ⅲ 分析標準品,≥97%白三烯B4受體1檢測試劑盒
阿拉伯樹膠 顆粒狀,手選精致級,淡黃色4-酮 98%白三烯B5檢測試劑盒
棕櫚蠟 熔點:82.5℃,深黃色3,3'-二硫代二二甲酯 96%白三烯C4檢測試劑盒
棕櫚蠟 熔點:>83℃,淡黃色3,3'-二硫代二 99%白三烯D4檢測試劑盒
還原鐵粉 AR,100目乙基脲 97%白三烯E4檢測試劑盒
膽固 AR,>95.0%(GC)甲基脲 98%白介1檢測試劑盒
鄰甲 99%N-基脲 97%白介11檢測試劑盒
99%間二甲二甲酯-5-磺鈉 98%白介12檢測試劑盒
4-甲 98%環(huán)丁基 98%白介12檢測試劑盒
二氧化錳 AR,85%5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物 97%白介12檢測試劑盒
金屬錳片 99.9% metals basis,不規(guī)則片狀N-對甲磺酰甘氨 98%白介12;23 p40檢測試劑盒
錳粉 99.99% metals basis,粉末阿斯巴甜 98%白介12 p40檢測試劑盒
雞源性快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管人T急性淋巴母白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒,TALLA-1納米氮化鈦死亡相關蛋白3抗體
人癌標志物-CA153ELISA試劑盒,2-(二-叔丁膦)-2'-甲基聯(lián)防御α6抗體
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒,ssDNA ELISA KIT2-(二-叔丁膦)-2'-甲基聯(lián)S期激活化蛋白DBF4B抗體
人雄激受體(AR)ELISA試劑盒, AR ELISA去甲托品酮鹽鹽脫氧胞激抗體
人維生D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒,DBP ELISA去甲托品酮鹽鹽短鏈脫氫還原3抗體
人糖原磷化同工II(GP-II)ELISA試劑盒,GP-II ELISA9-基-9-芴DNA聚合θ/DNA pol θ抗體
人抵抗(Resistin)ELISA試劑盒, Resistin ELISA氮化鎵DENN域內(nèi)含蛋白2D抗體
人泛連接(E3/UBPL)ELISA試劑盒,氮化銦(III)肌相關蛋白DAG1抗體
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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