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貨號 | FS-01S63414 |
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商品介紹:
測定意義
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬
(如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉肽酶和半胱氨亞砜裂解酶的作用下轉化成香菇精,以及產生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內源性甲醛生成的關鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。
測定原理
CSL催化S-甲基-L-半胱氨亞砜反應產生丙酮酸,與2,4-二硝基肼反應,在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
CSL半胱氨酰亞砜裂解酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | FS-01S63414 |
產品內容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
注意事項:
1、公司產品僅用于科研操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應當乘以稀釋倍數。
下列是公司正在熱銷的產品:
甘油-3-磷酰基轉移大鼠皮質酮/腎上腺酮glycerol-3-phosphate O-acyltransferase
脂肪腮腺炎病IgMLipase
肉棕櫚酰基轉移大鼠內皮1carnitine palmitoyltransterase
脂肪轉運蛋白腮腺炎病IgGfatty acid transport protein
脂肪脫飽和大鼠血管舒緩激肽fatty acid desaturase
葡萄糖激EB病IgMGlucokinase
胰島大鼠抵抗Insulin
酰基A氧化EB病IgAAcyl-CoA Oxidase
甲酰磷合成1大鼠催乳carbamoyl phosphate synthase 1
甲酰磷合成1大鼠促生長釋放carbamoyl phosphate synthase 1
丙羥化EB病IgGphenylalanine hydroxylase
甘油-3-磷酰基轉移利什曼原蟲抗體glycerol-3-phosphate O-acyltransferase
脂肪轉運蛋白大鼠促腎上腺皮質fatty acid transport protein
脂肪脫飽和大鼠促卵泡fatty acid desaturase
葡萄糖激登革熱抗體Glucokinase
CSL半胱氨酰亞砜裂解酶檢測試劑盒微量法熒光APC標記雞IgGAnti-IL17B Antibody小鼠突觸體相關蛋白25(SNAP-25) elisa定量檢測試劑盒
熒光APC標記雞IgMAnti-IL17F Antibody小鼠凝血受體(TR)elisa定量檢測試劑盒
熒光APC標記狗IgGAnti-IL18R1 Antibody小鼠Agouti相關蛋白(AgRP)elisa定量檢測試劑盒
熒光APC標記狗IgMAnti-IL18 Antibody小鼠突觸(SYP)elisa定量檢測試劑盒
熒光APC標記羊IgMAnti-IL18RAP Antibody小鼠硫氧化還原蛋白(Trx)elisa定量檢測試劑盒
熒光APC標記豚鼠IgGAnti-IL19 Antibody小鼠轉膜含Emp24結構域蛋白1(TMED1)elisa定量檢測試劑盒
熒光APC標記豚鼠IgMAnti-IL1B Antibody小鼠血管內皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)elisa定量檢測試劑盒
熒光APC標記馬IgGAnti-IL1A Antibody小鼠內皮蛋白C受體(EPCR)elisa定量檢測試劑盒
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