檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供

產品全稱：TRAIL-R3 進口檢測試劑盒

英文名稱：TRAIL-R3 ELISA Kit

產品貨號：A096822

規格：48T/96T

服務：公司產品僅用于科研可提供免費代測服務，以及產品說明書和技術指導等

保存環境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

動物細胞核分離試劑盒50次小鼠肺腺癌系；LA795兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）ELISA試劑盒,

細胞微管分離試劑盒10次C3H/An小鼠結締組織（L929-TK-）；LTK-胰島素樣生長因子1（IGF-1）ELISA試劑盒--動物，人

細胞/組織溶體粗提分離試劑盒10次小鼠B淋巴雜交瘤；SH2轉鐵蛋白受體（TFR/CD71）ELISA試劑盒--動物，人

細胞/組織活性溶體分離試劑盒10次小鼠B淋巴雜交瘤；SH3抗乙型肝炎病e抗體（HBeAb）ELISA試劑盒--動物，人

細胞/組織高質純化溶體分離試劑盒10次倉鼠/小鼠雜交瘤；145-2C11麻疹病IgM（MV IgM）ELISA試劑盒--動物，人

細胞過氧化體分離試劑盒10次小鼠黑色素瘤；B16馬尿-L-苯

細胞溶體形態染色試劑盒20次小鼠T淋巴；Cl.Ly1+2-/9甘草素 Liquiritigenin

純化溶體功能中性紅檢測試劑盒20次小鼠單核巨噬；J774A.1人肌腱蛋白R（TN-R）ELISA試劑盒,

分離溶體純度雙法（COX/AP）檢測試劑盒20次小鼠腎集合管(SV40轉化)；M-1人β連環蛋白/聯蛋白（β-Cat）ELISA試劑盒,

動物細胞染色體分離試劑盒20次綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌；MFC-GFP小鼠煙酰腺二核磷（NADPH）ELISA試劑盒,

植物細胞染色體分離試劑盒20次小鼠腎足；Mouse podocyte小鼠核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）ELISA試劑盒,

酵母細胞染色體分離試劑盒20次小鼠淋巴瘤；P388D1(IL-1)小鼠15脂加氧（15-LO/LOX）ELISA試劑盒,

細胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒10次小鼠子；U14兔子睪酮（T）ELISA試劑盒,

細胞/組織活性高爾基體分離試劑盒10次綠色熒光蛋白標記小鼠子；U14-GFP大腸菌素（colicin）ELISA試劑盒--動物，人

細胞/組織高質純化高爾基體分離試劑盒10次小鼠漿瘤；MPC-11Littman 瓊脂
TRAIL-R3 進口檢測試劑盒APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體橙花叔

甲胎蛋白單克隆抗體（包被）橙黃Ⅰ

甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)橙黃Ⅱ

（標準品）ADP核糖基化因子結合蛋白1抗體橙黃Ⅳ

（標準品）芳香烴受體抗體橙黃決明素

卡那替尼吸引素抗體橙黃決明素-6-葡萄糖

卡那替尼腺三磷結合盒轉運體A1抗體橙皮

卡蛋白激B2橙皮內酯

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。