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當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR快速檢測試劑盒>>PCR-熒光探針法/PCR法>> 豬源性成分快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-04-02 10:21:42瀏覽次數(shù):309次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)創(chuàng)傷弧菌快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管
貨號 | FS-02R6388 |
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特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:豬源性成分快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管 規(guī)格:48T 0.2PCR管 分類:PCR-熒光探針法 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 |
試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔) 2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。 3、 樣品稀釋液:1×20ml。 4、 檢測稀釋液A:1×10ml。 5、 檢測稀釋液B:1×10ml。 |
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
3-甲氧基 97%牡荊鼠李糖 分析標準品,≥98%UL16結(jié)合蛋白-3檢測試劑盒
2-甲基噻吩 99%牡荊-2-O-鼠李糖 分析標準品,≥98%Vasorin;SLIT-like 2檢測試劑盒
2-硝基噻吩 98%4-溴磺酰 98%WNT1可誘導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1檢測試劑盒
4-硫酚 90%D(-)-水楊 98%X盒結(jié)合蛋白1檢測試劑盒
2-萘硫酚 99%1,3-磺內(nèi)酯 99%X-連鎖凋亡抑制蛋白檢測試劑盒
2-硝基二硫 98%環(huán)己基 98%Yes關(guān)聯(lián)蛋白檢測試劑盒
3,3'-二硝基二二硫 98%碳亞乙烯酯 包含 <2% BHT穩(wěn)定劑,98%ZBED3檢測試劑盒
4,4'-二硝基二二硫 98%碳乙烯亞乙酯 99%ZNF3基因檢測試劑盒
4-硝基茴香硫 98%環(huán)丁砜 分析標準品,≥99.8% (GC)α;β干擾受體檢測試劑盒
N-烯N'-2-硫脲 98%環(huán)丁砜 >99.0%(GC)α1抗胰蛋白檢測試劑盒
2-噻吩基乙酰 98%環(huán)丁砜 CPα1性糖蛋白檢測試劑盒
2-硫基乙 98%環(huán)丁砜 Standard for GC,≥99.5%(GC)α1-微球蛋白檢測試劑盒
五硫酚 95%間溴甲 98%α2-HS糖蛋白檢測試劑盒
2-氨基二硫 98%間溴 99%α2巨球蛋白檢測試劑盒
基乙烯基硫 98%2,4-二 >98.0%(GC)α2抗纖溶檢測試劑盒
豬源性成分快速檢測試劑盒48T 0.2PCR管人α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒,α1-AGP ELISA kit6-(1H-吡唑-1-基)煙DNA聚合γ抗體
人血管緊張Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒, AT2R-Ab ELISA kit蔗糖十二烷酯死亡受體5抗體
人組織蛋白抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒,Cath Ab ELISAβ-6'-羥基異辛可寧橋粒芯糖蛋白4抗體
人沙眼衣原體(CT)ELISA試劑盒,CT ELISA羰酰二氫三(三基膦)釕(II)自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體
人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒,HCV-IgM ELISA十一烷基-β-D-麥芽糖自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體
人血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒,Ang-Ⅰ ELISA喹唑啉無精癥缺失基因4抗體
人卵泡抑(FS)ELISA試劑盒,FS ELISA喹唑啉多能發(fā)育相關(guān)基因4抗體
人(CH)ELISA試劑盒,CH ELISABoc-L-beta-谷氨 5-芐酯鋅指蛋白DZIP1抗體
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