詳細介紹
磷酸化雄激素受體抗體
英文名稱:Anti-phospho-AR(pSer580)(androgen receptor phospho-Ser580)
產品編號:A-01153
產品規格:0.1ml/0.2ml
產品說明及用途:
我們供應大量與生物素或多種熒光素偶聯的單抗和多抗。生物素偶聯的抗體不需要二抗,可通過鏈酶親和素或親和素偶統進行檢測。熒光素偶聯的抗體主要用于流式細胞儀檢測及細胞內或胞外相關分子的定量。
雄激素受體抗體單克隆抗體的制備過程:
1)免疫脾細胞的制備 制備單克隆抗體的動物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質。免疫方法同一般血清的制備,也可采用脾內直接免疫法。
2)骨髓瘤細胞的培養與篩選 在融合前,骨髓瘤細胞應經過含8-AG的培養基篩選,防止細胞發生突變恢復HGPRT的活性(恢復HGPRT的活性的細胞不能在含8-AG的培養基中存活)。骨髓瘤細胞用10%小牛血清的培養液在細胞培養瓶中培養,融合前24h換液一次,使骨髓瘤細胞處于對數生長期。
3)細胞融合的關鍵: 1技術上的誤差常常導致融合的失敗。例如,供者淋巴細胞沒有查到免疫應答。這必然要失敗的。
2融合試驗zui大的失敗原因是污染,融合成功的關鍵是提供一個干凈的環境,以及適宜的無菌操作技術。
4)陽性克隆的篩選 應盡早進行。通常在融合后10天作*次檢測,過早容易出現假陽性。檢測方法應靈敏、準確、而且簡便快速。具體應用的方法應根據抗原的性質,以及所需單克隆抗體的功能進行選擇。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法zui簡便,RIA法zui準確。陽性克隆的篩選應進行多次,均陽性時才確定為陽性克隆進行擴增。
5)克隆化 克隆化的目的是為了獲得單一細胞系的群體。克隆化應盡早進行并反復篩選。這是因為初期的雜交瘤細胞是不穩定的,有丟失染色體的傾向。反復克隆化后可獲得穩定的雜交瘤細胞株。
動物免疫
細胞融合
克隆篩選
交雜瘤細胞的克隆化
腹水制備與單抗純化
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