2019 03-18

植物總DNA的快速少量抽提實驗步驟

DNA分子是分子生物學研究的基本材料，依不同的實驗目的可采取不同的抽提方法獲取數量和質量不等的DNA。實驗目的是了解植物DNA抽提的主要方法，掌握CTAB法快速抽提水稻DNA。實驗方法原理CTAB法：...

2019 03-11

3-磷酸甘油醛脫氫酶的測定實驗

實驗方法原理GAPDH，D-磷酸甘油醛；NADP+氧化還原酶（磷酸化）。D-3-磷酸甘油醛＋NAD＋?1，3-磷酸甘油醛＋NADH＋H＋酶的實驗既可以在正反應方向也可以在偶聯后的逆反應方向進行。正反應...

2019 03-07

蛋白質沉淀濃縮方法原理及詳細解析

在生化制備中，沉淀主要用于濃縮目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制備中常用的有以下幾種沉淀方法和沉淀劑：1．鹽析法多用于各種蛋白質和酶的分離純化。2．有機溶劑沉淀法多用于生物小...

2019 03-04

WB 前傳：你了解你的目的蛋白嗎？

剛開始做Westernblot的同學們想必都大多都是研究生，雖然科研經歷還不是特別豐富，但情感經歷一定都比較豐富吧。同學們想想自己剛談戀愛的時候，你剛喜歡一個人卻還沒表白之前，是不是每天都要想盡一切辦...

2019 03-01

去除抗血清中交叉反應的抗體實驗方法

去除抗血清中交叉反應的抗體實驗：材料：試劑、試劑盒封閉緩沖液封閉試劑抗體LB頂層瓊脂糖LB平板瓊脂培養基儀器、耗材硝酸纖維素濾膜λ噬菌體載體cDNA文庫實驗步驟：緩沖液和溶液將貯存液稀釋到適當的濃度。...

2019 02-25

古朵生物：什么是無血清培養基？

無血清培養基的定義：無血清培養基(serumfreemedium)：是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。簡單地認為是體外細胞培養過程中的細胞培養基中不含有動物或人的血清，...

2019 02-18

血清保存與解凍應注意哪些

血清的保存應該注意以下幾點：(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體...

2019 02-12

如何解決懸浮細胞難感染的問題?

一般的懸浮細胞對于懸浮細胞，可采用離心感染方法提高感染效率。如將細胞培養板密封后，用平角轉子離心機1000g離心1h，再放回培養箱中正常培養。懸浮細胞病毒系列產品慢病毒：慢病毒對分裂細胞和非分裂細胞均...

2019 01-21

古朵生物：westblot完整版操作規程

Western印跡法這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位...

2019 01-16

分子實驗中常用生化試劑的作用原理匯總

知道原理對實驗出問題時分析很有益，所以列出來一起分享！1．溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌體細胞壁的主要化學成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵，因而具有溶菌的作用。當溶液中pH小于8時，溶菌酶作用受到抑制...

2019 01-14

如何選擇合適的細胞培養基？

近幾年，動物細胞培養技術已經擴展到生物學研究和商業生產的許多方面，成為廣泛采用的技術手段，而在細胞培養發展歷史中，細胞培養基的發展占有重要的位置。那么對于細胞培養基的發展以及如何選擇出合適的細胞培養基...

2019 01-11

土壤DNA 純化難點——腐殖質

土壤，是由一層層厚度各異的礦物質成分所組成大自然主體。土壤和母質層的區別表現在于形態、物理特性、化學特性以及礦物學特性等方面。由于地殼、水蒸氣、大氣和生物圈的相互作用，土層有別于母質層。它是礦物和有機...

2019 01-07

血藥濃度檢檢測方法分析

藥物代謝動力學（Pharmacokinetic,PK）是定量研究藥物在生物體內吸收、分布、代謝和排泄規律，并運用數學原理和方法闡述血藥濃度隨時間變化規律的一門學科。血清中血藥濃度的檢測在藥代動力學（p...

2019 01-02

古朵生物：常規切片的制作過程

【實驗目的】1.了解常規切片的制作過程。2.熟悉蘇木素－伊紅（hematoxylinａndeosin，HE）染色方法。【實驗原理】將各種方法（活檢、尸檢）獲取的組織標本經過一定的步驟處理，做成切片。蘇...

2018 12-26

植物組織培養中愈傷組織的形成和形態發生

在植物組織培養中，主要目標是誘導愈傷組織形成和形態發生，使一個離體的細胞、一塊組織或一個器官的細胞，通過脫分化形成愈傷組織，并由愈傷組織再分化形成植物體。愈傷組織的形成從一塊外植體形成典型的愈傷組織，...

2018 12-24

古朵：濃度測定新選擇，助力核酸定量

在分子生物學實驗中，核酸定量是*的一個過程，包括初提產物的核酸（gDNA和TotalRNA）質控，或者PCR產品和NGS文庫質控。目前常見的定量儀器是Nanoｄrop和Qubit，前者只需一兩微升的樣...

2018 12-17

實時熒光定量 PCR 引物設計原則

實時熒光定量PCR（real-timePCR）技術和普通PCR相比，準確性和靈敏度高，速度快，效率高，近年來被廣泛應用于醫學、生物等各個領域，是進行分子生物學研究*的技術工具。在科研方面可定量分析各種...

2018 12-13

抗體敲除驗證：捍衛實驗標準 確?？贵w特異性

據估計，因抗體質量不佳，生命科學領域每年的損失達到8億美元。這也造成了無數的實驗失敗，浪費了寶貴的資源和科學家的時間。盡管科學界已經意識到這個問題，但目前仍然缺乏抗體驗證的整體框架。為了刺激研究界實現...

2018 12-10

曲霉菌檢測：如何防止霉菌性傳染病

（1）流行特點：動物曲霉菌病是由曲霉菌屬的曲霉菌引起動物的一種以呼吸系統機能紊亂為特征的霉菌性傳染病。病原主要侵害呼吸系統，有時在全身各處也形成病灶。通常是因健康動物接觸污染的發霉飼料或墊料而感染。各...

2018 12-04

如何從腦漿組織中提取外泌體√

外泌體是由細胞內多泡體與細胞膜融合后，釋放到細胞外的一種直徑約30～150nm的膜性囊泡。幾乎所有的細胞都會產生外泌體，被分泌出的外泌體會進入各種體液，通過循環系統到達其他細胞與組織，產生遠程調控作用...