2020 11-26

基因克隆：高效感受態(tài)細(xì)胞制作

方法一A液：1M，MnCl2：B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用無菌水配，配后不需滅菌；C液稱取CaCl20.10g，KCl1.18g，全部轉(zhuǎn)入細(xì)口試劑瓶，然后加入46ml三蒸水，輕輕振...

2020 11-23

常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方法（原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)）

初代培養(yǎng)原理將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出，經(jīng)各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機(jī)械方法處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養(yǎng)。儀器、...

2020 11-20

RNA提取及注意事項(xiàng)

目的研究基因的表達(dá)和調(diào)控時(shí)，需要從組織或細(xì)胞中分離純化RNA。RNA質(zhì)量的高低經(jīng)常影響RT-PCR、cDNA庫構(gòu)建和NorthernBlot等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的成敗。主要試劑Trizol是一種新型總RN...

2020 11-18

微生物鑒定中常用的生化反應(yīng)

實(shí)驗(yàn)方法原理1.有些細(xì)菌具有合成淀粉酶的能力，可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解為麥芽糖和葡萄糖，淀粉水解后遇dian不再變藍(lán)色。2.細(xì)菌產(chǎn)生的脂肪酶能分解培養(yǎng)基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸...

2020 11-17

微生物培養(yǎng)室的設(shè)置

微生物的培養(yǎng)是幾乎所有微生物實(shí)驗(yàn)室都需要設(shè)計(jì)的功能間，我也見過很多不同的設(shè)計(jì)模式，但針對(duì)具體如何去布置，今天來了解下。一、微生物的分類微生物我們平常會(huì)分成2種，一種是病原微生物，也就是我們常說的生物安...

2020 11-16

中藥對(duì)照品純度如何分析及應(yīng)用

由于天然產(chǎn)物的化學(xué)成分結(jié)構(gòu)復(fù)雜，中藥對(duì)照品包括多種類型的化合物，分析這些化合物的手段也是多種多樣的，幾乎包括了化學(xué)分析所有常規(guī)方法。每種分析手段都不是萬能的，只能揭示化合物的一種或部分性質(zhì)，因此綜合使...

2020 11-13

預(yù)防細(xì)胞污染，你需要的不止一瓶70%的酒精

防不勝防的細(xì)胞污染一直是實(shí)驗(yàn)員的*敵人。無論是普通光學(xué)顯微鏡可以看得到的細(xì)菌、真菌和酵母，還是看不到的支原體污染，都會(huì)通過競(jìng)爭培養(yǎng)基里面的營養(yǎng)物質(zhì)來影響細(xì)胞的生長，終導(dǎo)致細(xì)胞實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)難以重復(fù)。發(fā)現(xiàn)污染...

2020 11-11

細(xì)胞凋亡：六種-佳測(cè)定方法

細(xì)胞凋亡是程序性細(xì)胞死亡的高度調(diào)控形式，在多細(xì)胞生物發(fā)育過程中、整個(gè)生命周期以及對(duì)細(xì)胞應(yīng)激作出反應(yīng)時(shí)均可發(fā)生細(xì)胞凋亡。核固縮、細(xì)胞皺縮、質(zhì)膜出泡和DNA斷裂是細(xì)胞凋亡的典型特征。Caspases蛋白水...

2020 11-10

微生物菌種保藏的六種方法

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于不活躍或相對(duì)靜止的狀態(tài)，才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以...

2020 11-09

牛血清的組成及應(yīng)用

胎牛血清、新生牛血清小牛血清均取從生態(tài)畜牧循環(huán)產(chǎn)業(yè)鏈的有機(jī)環(huán)境中的胎牛和新生牛提取，在特定無菌環(huán)境中及時(shí)采血，采用可杜絕微生物等外源因子污染的胎牛血清原料和先-進(jìn)的生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的。本血清經(jīng)過3次0.1...

2020 11-06

微載體培養(yǎng)技術(shù)介紹

（一）概述微載體培養(yǎng)技術(shù)于1967年被用于動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)。該技術(shù)目前已漸日趨完善和成熟，并廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)疫苗、基因工程產(chǎn)品等。微載體培養(yǎng)是目前*的-有發(fā)展前途的一種動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)，其兼具懸...

2020 11-04

彎曲菌的分離，可使用顯色培養(yǎng)基

彎曲菌是一種常見的導(dǎo)致人類腸炎的致病菌，以腹瀉為主要特征，并可從糞便中分離出來。ISO于2017年發(fā)布了新版的ISO10272-1:2017標(biāo)準(zhǔn)，即《食品鏈的微生物學(xué)，彎曲菌屬檢測(cè)和計(jì)數(shù)的水平方法》。...

2020 11-02

慢病毒包裝的介紹及優(yōu)點(diǎn)有哪些？

慢病毒包裝：慢病毒載體（Lentiviralvector,LVs）是在HIV-1病毒基礎(chǔ)上改造而成的病毒載體系統(tǒng)，它能高效的將目的基因（或RNAi）導(dǎo)入動(dòng)物和人的原代細(xì)胞或細(xì)胞系。慢病毒載體基因組是正...

2020 10-30

質(zhì)粒小量提取試劑盒常見問題與解析

質(zhì)粒小量提取試劑盒常見從1～4mL菌液可以抽提到5～30?g的質(zhì)粒，純度高，OD260/OD280比值一般為1.8-2.0之間，質(zhì)粒可直接用于PCR、酶切、轉(zhuǎn)化測(cè)序和體外轉(zhuǎn)錄等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。那么在實(shí)驗(yàn)過程...

2020 10-29

“干細(xì)胞”干什么都行的細(xì)胞

干細(xì)胞顧名思義——干什么都行的細(xì)胞，在醫(yī)學(xué)界，干細(xì)胞又被稱為全能干細(xì)胞或者萬用細(xì)胞，是一類具有自我更新能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞或組織器官。干細(xì)胞來源于胚胎、胎兒組織和成...

2020 10-28

攻克ELISA實(shí)驗(yàn)，你需要搞定這些問題

ELISA是蛋白定量的金標(biāo)準(zhǔn)，也是免疫學(xué)研究中-常用的實(shí)驗(yàn)方法之一。很多人覺得ELISA很簡單，其實(shí)不然。遠(yuǎn)慕生物帶你繞開ELISA實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的各種問題，輕松搞定ELISA實(shí)驗(yàn)~酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)197...

2020 10-26

免疫細(xì)胞種類以及T細(xì)胞/B細(xì)胞比較

免疫細(xì)胞的常見類型機(jī)體的免疫細(xì)胞大部分由骨髓造血干細(xì)胞分化而來，主要可以分為兩大類，即淋巴細(xì)胞和髓樣細(xì)胞，進(jìn)一步又可以分為更多類型。1.淋巴細(xì)胞（lymphocyte），主要包括：T細(xì)胞：通過特異性的...

2020 10-22

如何正確的融化血清！

做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會(huì)對(duì)血清凍融，怎么才能有效正確的利用血清也有對(duì)應(yīng)的方法，今天分析如何融化血清讓實(shí)驗(yàn)更好的完成。與4℃過夜法相比,三步法為什么對(duì)血清更好呢？重點(diǎn)有二！其一：關(guān)系到沉淀出現(xiàn)的幾率！記得嗎...

2020 10-21

細(xì)胞培養(yǎng)室的滅菌與消毒了解一下！

細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無菌環(huán)境的要求較為嚴(yán)格。細(xì)胞培養(yǎng)間的殺菌主要涉及空氣的殺菌，其常見的四種方法如下。1、甲醛熏蒸甲醛是一種高效能化學(xué)滅菌劑。不易燃、不爆-炸、不腐蝕金屬。它能與蛋白質(zhì)中的氨基酸結(jié)合而使蛋白變性...

2020 10-20

無外泌體血清制備方法

以外泌體為代表的細(xì)胞外囊泡是近幾年研究的熱點(diǎn)，目前的外泌體研究主要通過研究體外培養(yǎng)細(xì)胞來源的外泌體，分析其在體內(nèi)外的功能作用。一般的血清FBS中含有供體細(xì)胞自然分泌的大量Exosomes，而用于Exo...