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免疫熒光技術之熒光顯微鏡檢查方法2015/1/5

、熒光顯微鏡熒光顯微鏡是免疫熒光組織化學的基本工具，分透謝和落射二種類型，落射光無需鏡內操作，方便、效果更好。它是由超高壓光源、濾板系統（包括激發和壓制濾板）和光學系統等主要部件組成。是利用一定波長的...

免疫磁性微珠分離法分離T淋巴細胞和B淋巴細胞2014/12/29

材料及試劑1.磁性激活細胞分離器（MACS）：MACS柱（C型，可結合2×108個細胞）生物素標記的抗CD4單抗和抗CD8單抗2.生物素標記的羊抗鼠IgGF(Fab)23.FITC標記的親和素4.生物...

細胞培養用途2014/12/22

細胞培養的用途包括：1、科學研究：藥物研究開發與基礎研究藥物研究與開發（1）新藥篩選：如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。（2）疫苗研究與開發：如病毒性疫苗的研究與開發（肝炎病毒疫苗、艾...

正常大鼠原代心肌細胞培養2014/12/4

正常大鼠原代心肌細胞培養一、實驗試劑1、培養基：PriCellsMedium+10%FBS+1%P/S+PriCellsSupplement2、凍存液：PriCellsMedium+20%FBS+10...

人類外周血染色體制備2014/12/2

一、原理人外周血小淋巴細胞，通常都處在G1期（或G0期），一般情況下不進行分裂。如在培養液中加入植物血凝素（PHA），這種小淋巴細胞受到刺激可轉化為淋巴母細胞，進入有絲分裂。短期培養后，經秋水仙素處理...

外周血培養基配制2014/11/27

一、配制用水培養基的大部分是水，所以水的質量直接影響培養基的質量。按Waymouth標準，水的電阻應為200萬歐姆，一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。二、培養基培養基有天然...

細胞傳代吹打減少氣泡的方法2014/11/25

1.有一些細胞可以不用消化液就能夠吹打下來。個人認為能不用消化液是的。譬如巨噬細胞。我一直維持巨噬細胞，每次傳代都不用消化液，吹打的時候我一般會用瓶內未換的剩余舊培養液，這樣子比用新的培養基可以減少點...

細胞凋亡檢測-形態學2014/11/21

1、光學顯微鏡和倒置顯微鏡（1）未染色細胞：凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。（2）染色細胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡...

培養細胞的保存和復蘇2014/11/19

做實驗前要先學會凍存，以備自己在后面的實驗中能保持同一來源、穩定可靠的細胞，且可減少污染或其它不利影響。1、影響凍存細胞活性的因素（1）細胞凍存保護劑：常用的有二甲基亞砜（DMSO）和甘油，常用的濃度...

腫瘤細胞培養2014/11/17

腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置，首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是zui多的。另外腫瘤對人類是威脅zui大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其...

細胞培養污染的思考2014/11/17

污染是細胞培養技術中面臨的主要問題。由每一種細胞有其*的培養體系，因此污染造成后果也不盡相同。某些污染的發生往往難以察覺檢測，而且污染源能長期共存于培養體系中，這類染事實上大部分被人們忽視了。培養的細...

哺乳動物細胞表達系統及其研究進展2014/11/14

按照宿主細胞的類型，可將基因表達系統大致分為原核、酵母、植物、昆蟲和哺乳動物細胞表達系統。與其它系統相比，哺乳動物細胞表達系統的優勢在于能夠指導蛋白質的正確折疊，提供復雜的N型糖基化和準確的O型糖基化...

肺泡上皮細胞的分離2014/11/13

1、取得*無血液殘留的肺臟：實驗前將大鼠全身血液放凈，取得*無血液殘留的肺臟。2、消化肺組織：常用于細胞消化的酶有胰蛋白酶、彈性蛋白酶、膠原酶。胰蛋白酶是zui早用于消化、分離上皮細胞的酶，現在一般用...

畢氏酵母感受態細胞制備及轉化2014/11/10

1、畢氏酵母氯化鋰轉化法（1）試劑1MLiCl（用去離子蒸餾水配制，濾膜過濾除菌；必要時用消毒去離子水稀釋）50%PEG3350（SigmaP3640用去離子蒸餾水配制，濾膜過濾除菌，用較緊的蓋子的瓶...

293細胞培養技術2014/11/5

1、293細胞明顯適應酸性環境,pH值在6.9～7.1時,可順利貼壁生長,換液時動作要輕。一般用高糖的DMEM培養基。2、傳代：倒去廢液，PBS洗一次（輕），用0.02%EDTA與0.25%Tryps...