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動物組織核糖核酸的制備及測定2015/12/28

目的和要求1學習和掌握用苯酚法及鹽溶液法從動物組織提取核酸的原理及操作技術(shù)。2練習從動物組織提取RNA，并鑒定純度。實驗原理利用苯酚法可以直接從動物組織中提取RNA，組織勻漿用苯酚處理并離心后，RNA...

紫外吸收法測定DNA含量2015/12/24

（一）原理組成核酸分子的堿基，均具有一定的吸收紫外線特性，zui大吸收值在波長為250~270nm之間。核酸的zui大吸收波長是260nm，這個物理特性為測定核酸溶液濃度提供了基礎(chǔ)。在波長260nm紫...

RNA的提取與核酸的顏色反應(yīng)2015/12/21

一.目的學習用濃鹽法從酵母中提取RNA掌握用等電點法沉淀RNA觀察核酸的顏色反應(yīng)，了解核酸定性與定量測定的原理熟練掌握普通離心機的使用方法二.原理酵母繁殖快，生長周期短；其細胞質(zhì)中的核酸大部分是RNA...

如何進行擴增酶切片段多態(tài)性[AFLP]技術(shù)2015/12/16

擴增酶切片段多態(tài)性（AmplifiedRestrictionfragmentpolymorphism，AFLP）是由Zabeau等（1992）發(fā)明，并于1993年獲得歐洲，該的權(quán)現(xiàn)在由荷蘭Keygen...

反轉(zhuǎn)錄PCR2015/12/14

1原理RT—PCR是一種將cDNA合成與PCR技術(shù)結(jié)合分析基因表達的快速靈敏的方法，主要用于對表達信息進行檢測或定量分析,還可以用來檢測基因表達差異而不必構(gòu)建cDNA文庫克隆cDNA。RT-PCR的模...

真核細胞總RNA的制備2015/11/30

從細胞中分離RNA的純度于完整性對于許多分子生物學實驗至關(guān)重要。如Northern印跡與雜交分析、寡聚（dT）纖維素選擇分離mRNA，cDNA合成及體外翻譯等實驗的成敗，在很大程度上決定于RNA的質(zhì)量...

基因組步行法擴增3’及5’側(cè)翼序列2015/11/19

一．原理基因組步行技術(shù)是一種新發(fā)展的利用已知序列(cDNA或基因組DNA)從基因組中獲得基因的上游(如啟動子)或下游序列的方法。其原理如下：首先利用不同的具有平末端的DNA限制性內(nèi)切酶消化基因組DNA...

注意事項：RNA抽提指南（TRIZOL）2015/11/12

注意事項：*全程佩戴一次性手套。皮膚經(jīng)常帶有細菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成為RNA酶的來源。培養(yǎng)良好的微生物實驗操作習慣預(yù)防微生物污染。*使用滅菌的，一次性的塑料器皿和自動吸管抽提RNA，避免使...

DNA的純化濃縮與定量2015/11/3

實驗?zāi)康膶碗s的細胞分子混合物加入有機溶媒萃取以除去蛋白質(zhì)及其它成分，就可以純化DNA。一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白質(zhì)變性(denaturaion)的特性來進行萃取的...

[核酸抽提]mRNA的分離技巧2015/10/21

mRNA的分離與rRNA和tRNA不同的是，哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3"端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNAdmonds等...

支原體PCR檢測實驗報告2015/10/14

1.0物品、試劑：10ul及200ultip頭、0.2mlPCR薄壁管、管架、手套；DEPC處理水、Ex-Taq試劑盒（包括PCRBuffer、MgCl2、Taq酶）、DNAmarker均另購，引物/...

PCR自動檢測系統(tǒng)及其數(shù)據(jù)分析軟件設(shè)計2015/9/23

摘要：本文簡述了PCR基本原理以及模板擴增方法，介紹了pcr檢測系統(tǒng)的整體構(gòu)成，描述了信號檢測的A/D接口電路，討論了數(shù)據(jù)分析軟件的設(shè)計原理，并對兩種分析方法的特征和對結(jié)果的影響做了比較分析。關(guān)鍵字：...

PCR操作范例及反應(yīng)體系的組成2015/9/18

CR反應(yīng)條件不能產(chǎn)生所需的特異性產(chǎn)物，可采用新的寡核苷酸重新進行擴增，或用凝膠電泳來分離不同的PCR產(chǎn)物，而后再各自重新擴增進行序列分析。長度不同的片段可以用瓊脂糖凝膠電泳來分離:1.片段大小在80-...

如何確定RNA質(zhì)量的經(jīng)驗談！2015/9/6

1）檢測RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82....

NA干擾文庫及其在功能基因組學研究中的應(yīng)用2015/9/1

人類基因組大規(guī)模測序已經(jīng)基本完成。但破解基因組的序列只是一個起點，目前多數(shù)基因的功能還不清楚，因此基因功能的研究是今后的發(fā)展趨勢。傳統(tǒng)研究基因功能的zui有效技術(shù)之一是細胞和小鼠的基因敲除技術(shù)。但該技...