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HRP(辣根過(guò)氧化物酶)標(biāo)記抗體流程2011/12/23
1.8mg辣根過(guò)氧化物酶放入1ml玻璃瓶,加入1ml雙蒸水溶解,液體呈棕色。2.放入一個(gè)磁力攪拌子,電磁攪拌同時(shí)逐滴緩緩加入新配制的NaIO40.2ml,室溫下繼續(xù)攪拌40min,液體呈現(xiàn)草綠色。3....
乳過(guò)氧化物酶法(LPO)2011/12/21
本法反應(yīng)溫和,對(duì)抗原、抗體免疫活性影響小,已被廣泛應(yīng)用。缺點(diǎn)是標(biāo)記率較低,一般為20~40%。1.原理此法是利用乳過(guò)氧化物酶(Lactoperoxidase)有促進(jìn)微量過(guò)氧化氫對(duì)125I-的氧化作用,...
HPLC/53種緩沖液配制2011/12/20
HPLC/53種緩沖液配制乙醇—醋酸銨緩沖液(PH3.7)取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氫氧化銨溶液調(diào)節(jié)PH值至3.7,用水稀釋至1000ml即得。三...
蛋白質(zhì)的提取技術(shù)2011/12/15
選擇材料及預(yù)處理以蛋白質(zhì)和結(jié)構(gòu)與功能為基礎(chǔ),從分子水平上認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象,已經(jīng)成為現(xiàn)代生物學(xué)發(fā)展的主要方向,研究蛋白質(zhì),首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質(zhì)。蛋白質(zhì)的制備工作涉及物理、化學(xué)和生物等各...
FITC熒光素標(biāo)記抗體的操作步驟2011/12/13
當(dāng)FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應(yīng)時(shí),主要是蛋白質(zhì)上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵(thiocarbmide)結(jié)合,形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物,即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個(gè)IgG分子中有86個(gè)賴氨...
常用細(xì)胞株2011/12/9
CHO-K1細(xì)胞CHO-K1細(xì)胞是實(shí)驗(yàn)中非常常用的一個(gè)細(xì)胞株,在生物制藥中使用也非常廣泛。該細(xì)胞株培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單,貼壁強(qiáng)度適中,比較容易轉(zhuǎn)染,很適合用它來(lái)研究一般哺乳動(dòng)物基因的功能。來(lái)源:Cricetu...
活體染色與死的鑒定實(shí)驗(yàn)2011/12/8
【實(shí)驗(yàn)原理】活體染色是利用某種對(duì)植物無(wú)害的染料溶液對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色的技術(shù)。中性紅是常用的活體染料之一,它是一種弱堿性pH指示劑,變色范圍在pH6.4~8.0之間(由紅變黃)。在中性或微堿性環(huán)境中,植物...
質(zhì)譜測(cè)定蛋白原理與方法2011/12/7
質(zhì)譜方法(MassSpectroscope,MS)是通過(guò)正確測(cè)定蛋白質(zhì)分子的質(zhì)量而進(jìn)行蛋白質(zhì)分子鑒定、蛋白質(zhì)分子的修飾和蛋白質(zhì)分子相互作用的研究。質(zhì)譜儀通過(guò)測(cè)定離子化生物分子的質(zhì)荷比便可得到相關(guān)分子的...
免疫細(xì)胞常見(jiàn)知識(shí)要點(diǎn)2011/12/2
免疫細(xì)胞(組織)化學(xué)實(shí)驗(yàn)中如何選擇固定劑?固定劑主要有兩類(lèi):一類(lèi)是有機(jī)溶劑,如甲醇、乙醇、丙酮等。它們通過(guò)強(qiáng)烈脫水變性蛋白,同時(shí)它們也能夠溶解脂類(lèi)物質(zhì),因此產(chǎn)生通透效應(yīng)。另一類(lèi)為交聯(lián)劑,如甲醛、多聚甲...
纖維素酶酶活的測(cè)定方法2011/11/30
酶活性可分為全活性和比活性兩種。酶的全活性為每克干物質(zhì)每分鐘釋放的相應(yīng)糖的微摩爾(µmol)數(shù),單位為µmol/gDMmin。酶的比活性為每毫克蛋白每分鐘釋放的相應(yīng)糖的微摩爾(...
Dam、Dcm和CpG甲基化2011/11/29
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MTases)普遍存在于原核和真核生物中,能將S-腺苷甲硫氨酸上的甲基轉(zhuǎn)移到腺嘌呤或者是胞嘧啶上。當(dāng)使用限制性內(nèi)切酶消化DNA時(shí),要考慮是否有甲基化的問(wèn)題,這是因?yàn)槿绻R(shí)別序列中某個(gè)...
PH計(jì)的使用方法2011/11/23
一)保養(yǎng)1、pH玻璃電極的貯存短期:貯存在pH=4的緩沖溶液中;長(zhǎng)期:貯存在pH=7的緩沖溶液中。2、pH玻璃電極的清洗玻璃電極球泡受污染可能使電極響應(yīng)時(shí)間加長(zhǎng)??捎肅Cl4或皂液揩去污物,然后浸入蒸...
微生物的接種、分離和培養(yǎng)以及無(wú)菌操作2011/11/22
一、目的要求1、掌握各種分離、接種方法。2、掌握無(wú)菌操作基本環(huán)節(jié)。二、實(shí)驗(yàn)說(shuō)明微生物在自然界中呈混雜狀態(tài)存在,要獲得所需菌種,必需從中把它們分離出來(lái)。在保存菌種時(shí)不慎受到到污染也需予以分純。微生物分離...
培養(yǎng)基的靈敏度測(cè)試方法介紹2011/11/18
1.用于菌數(shù)計(jì)數(shù)的半固體瓊脂培養(yǎng)基促菌生長(zhǎng)(靈敏度)檢查的方法:對(duì)每個(gè)不同批號(hào)的脫水培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行靈敏度檢查(促菌生長(zhǎng)檢查)。取預(yù)先制備好的瓊脂培養(yǎng)基平皿3~5個(gè),用表面涂布法每塊平板表面接種30~1...
不標(biāo)記抗體法免疫電鏡技術(shù)2011/11/17
(一)原理標(biāo)記抗體法雖然具有許多優(yōu)點(diǎn),但也存在一些難以克服的問(wèn)題,如標(biāo)記抗體的分子增大,對(duì)細(xì)胞膜和組織的穿透力減弱;化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)對(duì)抗體和酶的活性有所影響;結(jié)合物中未標(biāo)記的抗體可與抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,影響檢測(cè)...

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